本文關(guān)鍵詞：草魚鈉磷協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)載體Slc34a2基因的克隆及組織表達(dá)分析

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【摘要】：為了揭示草魚對磷的吸收機(jī)制,運(yùn)用RT-PCR和快速擴(kuò)增c DNA末端方法,從草魚(Ctenopharyngodon idella)腸中克隆獲得鈉磷協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)載體基因Slc34a2,該基因全長為2446 bp,包含了1938 bp的開放閱讀框,47 bp的5′非編碼區(qū)(Untranslated region,UTR)和461 bp的3′UTR,編碼645個(gè)氨基酸。草魚SLC34A2蛋白的分子式為C3215H5125N801O902S30,分子量大小為70.39 k D,等電點(diǎn)為5.68,總平均疏水指數(shù)為0.458。對草魚SLC34A2蛋白結(jié)構(gòu)和功能預(yù)測分析,發(fā)現(xiàn)SLC34A2蛋白有11個(gè)跨膜域,1個(gè)半胱氨酸富集區(qū),且N-端在胞外而C-端在胞內(nèi),也在第二個(gè)細(xì)胞外環(huán)中發(fā)現(xiàn)4個(gè)N-糖基化位點(diǎn)。用鄰接法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹,發(fā)現(xiàn)草魚Slc34a2基因與硬骨魚類聚類為一支,且草魚SLC34A2蛋白與鯉(Cyprinus carpio)和斑馬魚(Danio rerio)SLC34A2的相似性最高,分別為90.3%和87.0%。實(shí)驗(yàn)采用了實(shí)時(shí)熒光定量PCR對草魚Slc34a2 m RNA進(jìn)行組織表達(dá)分析,結(jié)果表明Slc34a2 m RNA在組織中廣譜表達(dá),且在腸中表達(dá)最高,其次是肝臟、鰓、腎臟、脾臟、皮膚、肌肉、腦和頭腎。實(shí)驗(yàn)為以后研究提高魚對磷的利用和減少磷的排放奠定分子基礎(chǔ)。
【作者單位】： 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院淡水水產(chǎn)健康養(yǎng)殖湖北省協(xié)同創(chuàng)新中心;中國水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所農(nóng)業(yè)部東海與遠(yuǎn)洋漁業(yè)資源開發(fā)利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 草魚 Slca 分子克隆 基因表達(dá)
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31172421) 現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)基金(CARS-46)資助~~
【分類號】：S917.4
【正文快照】： 磷是核酸(ATP和GTP)、中間代謝(如:蛋白質(zhì)磷酸化、高能轉(zhuǎn)運(yùn)載體和血液緩沖)、細(xì)胞內(nèi)信號通路、細(xì)胞增殖(DNA和RNA)、細(xì)胞膜的磷脂成分和骨骼結(jié)構(gòu)所必須的一種礦物質(zhì)[1]。目前在商業(yè)飼料中無機(jī)磷的添加量普遍較高,大約每噸飼料含有20—25 kg的Ca(H2PO4)2?H2O,且在投喂的飼料中，

本文編號：692846