糞便中大腸癌特異性NDRG4基因甲基化水平的超高靈敏定量檢測(cè)法
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【摘要】:目的糞便中NDRG4基因的甲基化可作為一種無(wú)創(chuàng)檢測(cè)大腸癌的標(biāo)志物,但傳統(tǒng)DNA甲基化檢測(cè)方法因靈敏度低、特異性不高難以用于糞便樣本的檢測(cè)。文中旨在建立一種高靈敏、高特異的NDRG4基因甲基化定量檢測(cè)方法(2-ΔCT法),并用于患者糞便DNA樣本的檢測(cè)。方法選擇來(lái)自南京軍區(qū)南京總醫(yī)院的41例糞便樣本,其中12例大腸癌、4例腺瘤、25例正常人樣本。將核酸侵入反應(yīng)與實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)耦聯(lián),采用2-ΔCT法進(jìn)行相對(duì)定量,建立高靈敏高特異的DNA甲基化檢測(cè)方法,并用于41例糞便樣本中NDRG4基因甲基化水平的檢測(cè)。結(jié)果檢測(cè)了6例大腸癌組織及4例FFPE樣本中NDRG4基因甲基化水平,全部樣本中均能測(cè)出NDRG4基因甲基化,甲基化水平范圍為0.01%~6.09%。大腸癌、腺瘤患者及正常人中各有8例、4例、2例檢測(cè)到甲基化信號(hào),甲基化范圍分別為0.06%(0~0.51%)、6.61%(0~23.06%)、6.30%(0~51.01%)。大腸癌、腺瘤患者中甲基化檢出率(33.3%、50.0%)較正常人顯著升高(4.0%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論 2-ΔCT法可用于糞便樣本中NDRG4基因甲基化水平的準(zhǔn)確測(cè)定,為大腸癌的無(wú)創(chuàng)檢測(cè)提供了有力工具。
【作者單位】: 中國(guó)藥科大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;南京軍區(qū)南京總醫(yī)院藥理科;
【關(guān)鍵詞】: 大腸癌 NDRG基因 DNA甲基化 核酸侵入反應(yīng)
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(21275161,21475151) 江蘇省臨床科技專項(xiàng)-新型診療技術(shù)攻關(guān)資助項(xiàng)目(BL2012061) 江蘇省“六大人才高峰”項(xiàng)目(2015-WSN-085)
【分類號(hào)】:R735.34
【正文快照】: 0引言大腸癌是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì),早期大腸癌5年生存率達(dá)90%以上,中晚期常不足50%。然而超過(guò)60%的大腸癌患者被確診時(shí)已處于中晚期[2-3]。因此,針對(duì)廣泛人群尤其是高危人群的大腸癌早期篩查診斷具有非常重大的意義。目前,臨床上大腸癌篩查主要依靠糞便隱血試驗(yàn)
【相似文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):671541
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