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硒蛋白x基因沉默和過氧化氫處理對(duì)人正常肝臟細(xì)胞中硒蛋白基因表達(dá)和抗氧化酶活性的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-08-14 01:19

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【摘要】:本試驗(yàn)旨在探討硒蛋白x(Selx)基因沉默和過氧化氫(H2O2)處理對(duì)人正常肝臟細(xì)胞(LO2)中硒蛋白基因表達(dá)和抗氧化酶活性的影響,為探索Selx與其他硒蛋白之間的調(diào)控關(guān)系及Selx的功能奠定基礎(chǔ)。對(duì)本實(shí)驗(yàn)室保存的Selx基因穩(wěn)定沉默LO2細(xì)胞株(si Selx)和對(duì)照細(xì)胞株(CK),利用噻唑蘭(MTT)法比較其生長(zhǎng)速率;si Selx和CK用200μmol/L H2O2處理2.5 h后,采用熒光定量PCR技術(shù)考察25個(gè)硒蛋白基因的表達(dá)量;同時(shí)比較Selx基因沉默以及H2O2處理對(duì)LO2細(xì)胞株中谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及總抗氧化能力(T-AOC)的影響。結(jié)果顯示:1)Selx基因沉默顯著降低了LO2細(xì)胞株的生長(zhǎng)速率(P0.05);2)Selx基因沉默顯著上調(diào)了G px6、Txnrd2、Seli基因的表達(dá)量(P0.05),顯著下調(diào)了Dio2、Dio3、Selm、Sepw1基因的表達(dá)量(P0.05);H2O2處理顯著上調(diào)了Dio1基因的表達(dá)量(P0.05),顯著下調(diào)了G px2基因的表達(dá)量(P0.05);Selx基因沉默后H2O2處理顯著上調(diào)了G px6、Txnrd2、Dio1基因的表達(dá)量(P0.05),顯著下調(diào)了Txnrd3、Dio2、Selm、Sepw1、Selv基因的表達(dá)量(P0.05);3)Selx基因沉默顯著提高了LO2細(xì)胞株GSH-Px活性(P0.05),顯著提高了SOD的活性(P0.05);Selx基因沉默后H2O2處理顯著提高了GSH-Px活性(P0.05)。由此可見,Selx基因沉默降低了LO2細(xì)胞株的生長(zhǎng)速率,Selx基因沉默后H2O2處理影響部分硒蛋白基因在細(xì)胞中的表達(dá)量,同時(shí)也影響了GSH-Px、SOD活性。
【作者單位】: 四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)研究所;
【關(guān)鍵詞】Selx基因 沉默 HO 表達(dá)
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31072043,31272468) 四川隆達(dá)畜牧科技有限公司項(xiàng)目(2015SCLD001)
【分類號(hào)】:S816
【正文快照】: 硒(Se)是哺乳動(dòng)物新陳代謝所必需的基本微量元素,在動(dòng)物的生長(zhǎng)、繁殖等方面起著重要作用。Se在動(dòng)物體內(nèi)主要以硒蛋白的形式來發(fā)揮其多種生理功能,在人中已分離得到了25種硒蛋白[1]。很多硒蛋白在動(dòng)物體內(nèi)是作為細(xì)胞重要的抗氧化防御系統(tǒng),起著清除氧自由基、保護(hù)生物膜完整等功

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本文編號(hào):670010

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