本文關(guān)鍵詞：家蠶C-型凝集素11基因BmCTL11的克隆及表達(dá)分析

  更多相關(guān)文章： 家蠶 C-型凝集素 基因克隆 表達(dá)譜 微生物誘導(dǎo) 多克隆抗體

【摘要】：昆蟲的C-型凝集素參與先天免疫系統(tǒng)中細(xì)胞間的相互作用,家蠶C-型凝集素11(C-type lectins,CTL11)基因BmCTL11是經(jīng)家蠶微孢子蟲(Nb)感染誘導(dǎo)后在蠶體內(nèi)持續(xù)高量表達(dá)的基因。用生物信息學(xué)方法分析BmCTL11基因編碼有307個氨基酸的多肽,預(yù)測分子質(zhì)量34.51 kD,等電點(diǎn)4.69,含2個串聯(lián)的典型C-型凝集素糖識別結(jié)構(gòu)域,與煙草天蛾的IML-1蛋白進(jìn)化距離最近。RT-PCR檢測BmCTL11基因在家蠶幼蟲時期的轉(zhuǎn)錄水平較高,并在多個組織有轉(zhuǎn)錄。將滅活的家蠶病原細(xì)菌、真菌、微孢子蟲、病毒等注射家蠶5齡幼蟲后的24 h內(nèi),qRT-PCR檢測BmCTL11基因在幼蟲脂肪體和中腸組織內(nèi)的轉(zhuǎn)錄水平均發(fā)生上調(diào),說明該基因能夠被多種病原微生物誘導(dǎo)。以家蠶5齡第3天幼蟲脂肪體c DNA為模板克隆了BmCTL11基因,連接到p ET-32a載體,誘導(dǎo)表達(dá)后將純化的融合蛋白免疫昆明鼠制備出效價為1∶102 400的BmCTL11多克隆抗體。Western blot分析結(jié)果顯示,BmCTL11蛋白可能以二聚體形式主要分布于家蠶脂肪體、血漿、中腸、表皮等組織中,推測BmCTL11在家蠶識別病原微生物并介導(dǎo)引發(fā)進(jìn)一步的先天免疫反應(yīng)過程中有重要的作用。
【作者單位】： 家蠶基因組生物學(xué)國家重點(diǎn)實驗室西南大學(xué);重慶師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 家蠶 C-型凝集素 基因克隆 表達(dá)譜 微生物誘導(dǎo) 多克隆抗體
【基金】：國家重大基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃“973”項目(No.2012CB1146-04) 國家高技術(shù)研究發(fā)展計劃“863”項目(No.2013AA1-02507) 西南大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項“創(chuàng)新團(tuán)隊”項目(No.XDJK2015A010)
【分類號】：S881.2;Q78
【正文快照】： 昆蟲的先天免疫無論是細(xì)胞免疫還是體液免疫,首先需要對入侵病原微生物進(jìn)行識別,在此過程中機(jī)體的免疫識別分子/受體能夠識別并結(jié)合病原表面比較保守的被稱為病原相關(guān)分子模式(PAMPs)的物質(zhì)[1]。免疫識別分子/受體是昆蟲先天免疫系統(tǒng)中的關(guān)鍵因子,由參與先天免疫的細(xì)胞合成與

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 姜曉旭;唐錫華;;凝集素在植物中的生理功能[J];植物生理學(xué)通訊;1989年04期

2 劉慶法,郝崢嶸,曲志才,陳永青,沈大棱;禾谷類植物胚凝集素基因的分子起源與進(jìn)化[J];復(fù)旦學(xué)報(自然科學(xué)版);2001年05期

3 張成省,李多川,孔凡玉;凝集素的分離純化、基因克隆及功能研究進(jìn)展[J];山東科學(xué);2003年02期

4 旺姆;植物凝集素及其研究現(xiàn)狀[J];西藏科技;2004年04期

5 龐永珍,姚劍虹,申國安,唐克軒,談鋒;蔥蓮凝集素基因的克隆(英文)[J];西南師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版);2002年03期

6 Maarten J.Chrispeels;Natasha V.Raikhel;謝文凱;;凝集素、凝集素基因及其在植物防御中的作用[J];世界科學(xué);1991年08期

7 趙寅生;凝集素生物學(xué)功能及應(yīng)用(綜述)[J];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2001年04期

8 殷曉麗;李婷婷;劉東亮;王燕;孫素榮;;豆科凝集素研究進(jìn)展[J];中國生物工程雜志;2011年07期

9 羅瑞鴻,李楊瑞;木豆凝集素的提取及凝血性研究簡報[J];廣西農(nóng)業(yè)生物科學(xué);2004年03期

10 朱亞然;王捷;黃炳球;侯學(xué)文;;海芋凝集素cDNA的分子克隆及其性質(zhì)預(yù)測(英文)[J];植物生理與分子生物學(xué)學(xué)報;2006年06期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 唐克軒;孫小芬;姚劍虹;龐永珍;費(fèi)炯;趙秀云;開國銀;柴有榮;廖志華;;石蒜科和天南星科植物凝集素基因的克隆及抗蟲性研究[A];中國植物生理學(xué)會全國學(xué)術(shù)年會暨成立40周年慶祝大會學(xué)術(shù)論文摘要匯編[C];2003年

2 張靜嫻;荊玉祥;沈世華;王逸群;高越峰;單雪琴;;豌豆凝集素和血紅蛋白基因?qū)λ镜霓D(zhuǎn)化和表達(dá)[A];全國植物分子生物學(xué)與生物技術(shù)學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2000年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 陳中海;馬蹄蓮、石斛和姜凝集素基因的克隆及分析[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

2 王逸群;根瘤菌感染煙草、水稻及豌豆凝集素基因在煙草中的表達(dá)[D];中國科學(xué)院植物研究所;2000年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 季小存;家蠶C-型凝集素11（BmCTL11）的表達(dá)特征及功能初探[D];西南大學(xué);2015年

2 吳傳芳;1.石蒜凝集素的純化、性質(zhì)及構(gòu)象研究　2.單子葉石蒜科植物朱頂紅和風(fēng)雨花甘露糖結(jié)合凝集素基因的克隆及序列分析[D];四川大學(xué);2003年

3 李建;大黑花云豆凝集素的分離純化性質(zhì)研究及玉竹凝集素的基因克隆研究[D];四川大學(xué);2007年

4 劉金枝;麥冬凝集素與蜘蛛抱蛋凝集素的基因克隆及序列分析[D];四川大學(xué);2007年

5 丁帥;轉(zhuǎn)野生薺菜凝集素基因棉花對非靶標(biāo)動物的安全性研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

6 戴蕾;麥冬凝集素的分離純化及其部分性質(zhì)研究[D];四川大學(xué);2007年

7 高順;巖豆凝集素的化學(xué)修飾與光譜分析；風(fēng)雨花甘露糖結(jié)合凝集素基因的生物信息學(xué)分析及其在大腸桿菌中的表達(dá)與純化[D];四川大學(xué);2005年

8 申劍;苦蕎凝集素的純化及性質(zhì)鑒定[D];山西大學(xué);2015年

9 張利芬;鈴夜蛾屬二近緣種凝集素性質(zhì)的研究[D];河南農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

10 陳婧宜;刀豆凝集素提取分離純化及性質(zhì)研究[D];江南大學(xué);2008年

，

本文編號：667067