發(fā)布時間：2017-08-13 07:00

  本文關(guān)鍵詞：人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞ACTG1基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)

  更多相關(guān)文章： 人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 ACTG基因 p ACGFP HEK細(xì)胞 單增李斯特菌

【摘要】：為了構(gòu)建人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞ACTG1基因的真核表達(dá)載體及在HEK293細(xì)胞中的表達(dá),本研究采用RT-PCR方法,以單增李斯特菌侵染的人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞提取的總RNA為模板,擴增ACTG1基因片段,TA克隆后經(jīng)Sal I和Eco R I雙酶切、測序等鑒定重組質(zhì)粒,重組質(zhì)粒再經(jīng)雙酶切,與真核表達(dá)載體p ACGFP連接,酶切鑒定后,Lipofactamine 2000轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞,熒光顯微鏡檢測綠色熒光;同時采用Western-blotting對表達(dá)產(chǎn)物進行了鑒定。結(jié)果表明:PCR擴增得到1128 bp的ACTG1基因片段,ACTG1-p ACGFP真核表達(dá)載體構(gòu)建成功,轉(zhuǎn)染24 h后,在熒光顯微鏡下可見綠色熒光,Western-blotting檢測分析,其分子量約為68 k Da的融合蛋白,與預(yù)期的大小相符合,表明重組蛋白表達(dá)成功,本研究為單增李斯特菌與腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞c DNA文庫中相互作用蛋白的篩選和鑒定奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 石河子大學(xué)動物科技學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞 ACTG基因 p ACGFP HEK細(xì)胞 單增李斯特菌
【基金】：國家自然科學(xué)基金項目(31160506)
【分類號】：R743
【正文快照】： 單核細(xì)胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)簡稱單增李斯特菌,是一種常見的食源性致病菌,廣泛分布于自然界中,并能通過多種途徑進入食品及食品加工環(huán)境,可以引起人和動物的李氏桿菌病(Listeriosis)。雖然該病發(fā)病率不高,但致死率可達(dá)20%-40%。在世界范圍內(nèi)已引起高度關(guān)

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 馮家望;吳小倫;陳靜靜;王小玉;李丹琳;唐食明;游淑珠;;食品中李斯特菌污染狀況研究[J];中國食品衛(wèi)生雜志;2007年01期

【共引文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 高彭;梁和平;陳東宛;劉秀峰;王瑞霞;甄國新;黃曉鳳;談敦芳;孫雪媛;劉曉濤;;北京市順義區(qū)食源性致病菌污染調(diào)查[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2009年14期

2 王發(fā)園;陳欣;;食品的微生物污染[J];中國農(nóng)村小康科技;2009年04期

3 王安禮;劉長宏;馬國柱;潘立;張芳;李雪梅;石一;;兩類食品中三種致病菌和衛(wèi)生細(xì)菌指標(biāo)檢測結(jié)果與分析[J];中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;2009年02期

4 沈瑩;;單核細(xì)胞增生性李斯特菌在食品安全中的研究近況[J];中國熱帶醫(yī)學(xué);2008年03期

5 朱獻忠;;單核細(xì)胞增生性李斯特菌研究進展[J];中國衛(wèi)生檢驗雜志;2007年07期

【二級參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 馮家望,吳小倫,黃云君,王小玉,薄清如,陳靜靜;食品中單核增生性李斯特菌的PCR快速檢測研究[J];中國食品衛(wèi)生雜志;2005年03期

2 劉秀峰,陳平,吳護華;單核細(xì)胞增多性李斯特菌病研究近況[J];實用預(yù)防醫(yī)學(xué);2001年01期

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 盧宇;張旭;燕志強;王燕飛;鄭龍燕;郭菲菲;程靜;韓東一;陳曉巍;袁慧軍;;外顯子組測序一個常染色體顯性遺傳非綜合征型聾家系致病基因ACTG1[J];中華耳科學(xué)雜志;2013年03期

，

本文編號：665958