本文關(guān)鍵詞：FAT10基因沉默對(duì)人食管癌細(xì)胞凋亡及腫瘤干細(xì)胞特性的影響

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【摘要】：背景:人類白細(xì)胞抗原F介導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子10(human leukocyte antigen F-associated transcript 10,FAT10)在結(jié)腸癌等很多種腫瘤細(xì)胞中會(huì)發(fā)生高表達(dá),但其與食管癌的關(guān)系報(bào)道較少。目的:觀察siRNA干擾技術(shù)沉默類泛素蛋白(FAT10)基因表達(dá)對(duì)人食管癌細(xì)胞EC9706細(xì)胞的侵襲、凋亡及及腫瘤干細(xì)胞特性的影響。方法:根據(jù)FAT10 mRNA編碼序列設(shè)計(jì)并合成干擾siRNA序列,瞬時(shí)轉(zhuǎn)染EC9706細(xì)胞。將人食管癌細(xì)胞EC9706細(xì)胞分為3組,設(shè)FAT10 siRNA組,陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組。用RT-PCR和Western blot法分別從mRNA水平和蛋白水平檢測(cè)FAT10及bcl-2的表達(dá);CCK-8法測(cè)定細(xì)胞體外增殖能力;流式細(xì)胞技術(shù)觀察細(xì)胞凋亡及腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD44~+CD133~+的表達(dá);TUNEL染色檢測(cè)各組細(xì)胞的的凋亡、細(xì)胞侵襲小室法檢測(cè)各組細(xì)胞的體外侵襲力。結(jié)果與結(jié)論:(1)RT-PCR和Western blot顯示,FAT10 siRNA組較陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組FAT10及bcl-2 mRNA和蛋白表達(dá)都明顯下降(P0.05);(2)腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD44~+CD133~+的表達(dá)比例顯著降低(P0.05);(3)與陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組相比,FAT10 siRNA組細(xì)胞的凋亡率明顯升高(P0.01),增殖、侵襲力顯著下降(P0.05)。(4)結(jié)果表明,特異性沉默F(xiàn)AT10基因表達(dá)能夠降低食管癌細(xì)胞的侵襲力,抑制細(xì)胞的增殖,促進(jìn)bcl-2表達(dá)降低,使其凋亡顯著增加,使具有CD44~+CD133~+腫瘤干細(xì)胞特性的細(xì)胞比例降低。
【作者單位】： 解放軍150醫(yī)院心胸外科;天津市第四中心醫(yī)院神經(jīng)外科;
【關(guān)鍵詞】： 干細(xì)胞 RNA干擾 腫瘤干細(xì)胞 細(xì)胞凋亡 食管癌 組織工程 FAT 凋亡
【分類號(hào)】：R735.1
【正文快照】： 文章快速閱讀:si RNA干擾技術(shù)沉默類泛素蛋白(FAT10)基因表達(dá)對(duì)人食管癌細(xì)胞特性的影響根據(jù)FAT10 mR NA轉(zhuǎn)染檢測(cè):編碼序列設(shè)計(jì)合成EC9706細(xì)胞(1)食管癌細(xì)胞FAT10及bcl-2干擾si RNA序列mR NA和蛋白表達(dá);(2)細(xì)胞體外增殖能力;(3)細(xì)胞CD44+CD133+的表達(dá);FAT10 siR NA組陰性對(duì)照組

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本文編號(hào)：632050