本文關(guān)鍵詞：鯉皰疹病毒Ⅱ型對異育銀鯽背鰭細(xì)胞的顯微形態(tài)與免疫基因表達(dá)水平的影響

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【摘要】：為研究鯉皰疹病毒Ⅱ型(Cy HV-2)體外感染復(fù)制特征以及異育銀鯽抗病毒免疫應(yīng)答反應(yīng)。本實驗采用組織塊培養(yǎng)法建立了異育銀鯽背鰭細(xì)胞的原代培養(yǎng)體系。結(jié)果顯示,在10 d左右可觀察到組織塊遷移分離出新的單層細(xì)胞,3周左右細(xì)胞可覆蓋底部面積為25cm2培養(yǎng)瓶的底部;經(jīng)Cy HV-2懸液感染離體培養(yǎng)的原代細(xì)胞,3 d后病毒滴度增殖至106拷貝/m L;在病毒感染6 d后出現(xiàn)典型的細(xì)胞病變效應(yīng);Cy HV-2感染原代細(xì)胞后,分析前期通過魚體水平實驗鑒定出的與該病毒感染相關(guān)的免疫基因:PNP5a、MPO、MHCⅠ、LYZ-C、IL-11、ITLN、PNP5a和DUSP,Real-time Rt-PCR結(jié)果顯示大部分基因在細(xì)胞水平均有顯著性的上調(diào),與魚體水平實驗結(jié)果一致。本研究建立了原代培養(yǎng)的異育銀鯽背鰭細(xì)胞,用于構(gòu)建體外感染Cy HV-2病毒的細(xì)胞模型,為深入研究Cy HV-2的感染復(fù)制規(guī)律及其與宿主的相互作用關(guān)系,以及細(xì)胞水平篩選抗病毒藥物實驗奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 上海海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院國家水生動物病原庫;日本國家水產(chǎn)研究所漁業(yè)研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 異育銀鯽 鯉皰疹病毒Ⅱ型 背鰭細(xì)胞 原代培養(yǎng) Real time Rt-PCR
【基金】：現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(CARS-46-12)~~
【分類號】：S943
【正文快照】： 2.日本國家水產(chǎn)研究所漁業(yè)研究中心,東京516-0193)鯽(Carassius auratus)是我國傳統(tǒng)的養(yǎng)殖品種,其中由興國紅鯉(Cyprinus carpio var.xingguonensis為父本,以天然雌核發(fā)育的方正銀鯽(C.auratusgibelio)為母本,經(jīng)人工授精繁育出來的異育銀鯽,是目前我國養(yǎng)殖最為廣泛的鯽品種之

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