本文關(guān)鍵詞：黑龍江地區(qū)豬源致病性大腸桿菌耐藥性分析及PMQR基因檢測(cè)

  更多相關(guān)文章： 豬源致病性大腸桿菌 多重耐藥 水平傳播 接合子

【摘要】：在一段時(shí)間內(nèi),大腸桿菌被視為人和動(dòng)物正常腸道菌群的組成部分,但后期的研究發(fā)現(xiàn),某些血清型的大腸桿菌對(duì)于人和動(dòng)物卻有病原性,發(fā)生在豬身上則常表現(xiàn)為仔豬黃白痢以及豬水腫病,給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失,抗菌藥物因此被廣泛甚至不合理使用,這就導(dǎo)致大腸桿菌耐藥性不斷增強(qiáng),尤其是多重耐藥現(xiàn)象日益嚴(yán)重,同時(shí)接合性質(zhì)粒等可移動(dòng)遺傳元件在耐藥性水平傳播過(guò)程中發(fā)揮了重要的作用,使得細(xì)菌產(chǎn)生獲得性耐藥性的現(xiàn)象不斷發(fā)生,因此細(xì)菌耐藥性分析及水平傳播機(jī)制成為了當(dāng)今相關(guān)學(xué)科爭(zhēng)相研究的熱點(diǎn)。氟喹諾酮類藥物在養(yǎng)豬業(yè)不斷得到使用,伴隨之而來(lái)的耐藥性也逐漸加重,雖然氟喹諾酮耐藥基因一般介導(dǎo)低水平耐藥,但是多種耐藥基因的相互組合,或是與其他耐藥機(jī)制的相互作用都可帶來(lái)高水平耐藥,甚至達(dá)到臨床耐藥。本試驗(yàn)對(duì)分離自黑龍江省部分地區(qū)的致病性大腸桿菌進(jìn)行了耐藥性分析,同時(shí)重點(diǎn)對(duì)質(zhì)粒介導(dǎo)的氟喹諾酮耐藥基因進(jìn)行了檢測(cè),并通過(guò)接合試驗(yàn),對(duì)耐藥性水平傳遞的可能性進(jìn)行了研究,旨在為該地區(qū)更加合理用藥,以及后期耐藥性的消除提供一定的理論依據(jù)。根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn),本次試驗(yàn)通過(guò)微量肉湯二倍稀釋法測(cè)定106株臨床分離致病性菌株對(duì)8種常見藥物的最小抑菌濃度(MIC),調(diào)查研究黑龍江省部分地區(qū)的致病性大腸桿菌對(duì)8種臨床常見藥物的耐藥情況以及多重耐藥大腸桿菌的檢出率,試驗(yàn)結(jié)果為:106株豬源致病性大腸桿菌對(duì)8種獸醫(yī)臨床常用抗菌藥物耐藥率較高,均超過(guò)30%,其中對(duì)氟苯尼考的耐藥率最高,高達(dá)72.64%;其次對(duì)頭孢曲松(70.75%)、頭孢噻呋(70.75%)、慶大霉素(66.04%)、阿米卡星(64.15%)耐藥率非常高;對(duì)恩諾沙星(56.60%)、環(huán)丙沙星(48.11%)、多西環(huán)素(32.08%)耐藥率也較高,且表現(xiàn)多重耐藥(二重及以上耐藥)的菌株所占比率高達(dá)73.58%。本試驗(yàn)還采用了紙片擴(kuò)散法,進(jìn)一步證實(shí)了耐藥性數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。本試驗(yàn)對(duì)106株豬源致病性大腸桿菌質(zhì)粒介導(dǎo)的氟喹諾酮耐藥(Plasmid mediated fluoroquinolone resistant,PMQR)基因流行情況進(jìn)行了檢測(cè),其中oqx AB,qnr S,aac(6’)-Ib-cr,qnr B,qep A的檢出率分別為44.34%,40.57%,14.15%,8.49%,7.55%,而其它基因并沒(méi)有檢測(cè)到,這表明,現(xiàn)階段PMQR基因分布率已經(jīng)呈現(xiàn)上升趨勢(shì),所造成的直接后果就是用藥療效低,進(jìn)而由于基因水平傳播造成超級(jí)細(xì)菌的出現(xiàn)。本試驗(yàn)還通過(guò)接合試驗(yàn),對(duì)耐藥性水平傳遞的可能性進(jìn)行了研究,同時(shí)通過(guò)比較接合前后耐藥表型以及耐藥基因型的變化,探討可移動(dòng)質(zhì)粒在耐藥性水平傳播過(guò)程中所起到的作用,試驗(yàn)結(jié)果如下:41株氟喹諾酮耐藥且PMQR基因陽(yáng)性的供體菌共接合成功16株細(xì)菌,接合成功率高達(dá)39%,通過(guò)試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以深刻的認(rèn)識(shí)到,一方面必須加大對(duì)耐藥基因的監(jiān)測(cè)力度;同時(shí)另一方面還必須對(duì)耐藥基因的水平傳播機(jī)制進(jìn)行研究,以期為新獸藥的研發(fā)以及耐藥性的消除提供一定的理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：豬源致病性大腸桿菌 多重耐藥 水平傳播 接合子
【學(xué)位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：S852.612
【目錄】：

• 摘要8-9
• 英文摘要9-11
• 1 前言11-19
• 1.1 大腸桿菌概述11-13
• 1.1.1 大腸桿菌的致病性11-12
• 1.1.2 大腸桿菌的流行性12
• 1.1.3 大腸桿菌的耐藥現(xiàn)狀12-13
• 1.2 氟喹諾酮藥物的應(yīng)用近況及抗菌作用機(jī)制13-14
• 1.2.1 氟喹諾酮藥物的應(yīng)用近況13-14
• 1.2.2 氟喹諾酮類藥物的抑菌機(jī)制14
• 1.3 大腸桿菌對(duì)氟喹諾酮類藥物的耐藥情況及耐藥機(jī)制14-17
• 1.3.1 大腸桿菌對(duì)氟喹諾酮類藥物的耐藥研究現(xiàn)狀14-15
• 1.3.2 大腸桿菌對(duì)氟喹諾酮類的耐藥機(jī)理15-17
• 1.4 水平基因轉(zhuǎn)移概述17-18
• 1.5 研究的目的與意義18-19
• 2 材料與方法19-29
• 2.1 試驗(yàn)材料19-21
• 2.1.1 試驗(yàn)試劑19
• 2.1.2 主要儀器與設(shè)備19-20
• 2.1.3 培養(yǎng)基和常用溶液配制20-21
• 2.2 試驗(yàn)方法21-29
• 2.2.1 樣本的采集21
• 2.2.2 大腸桿菌的分離培養(yǎng)21
• 2.2.3 大腸桿菌菌株的鑒定21-22
• 2.2.4 大腸桿菌致病性試驗(yàn)22
• 2.2.5 菌株的儲(chǔ)存22
• 2.2.6 豬源致病性大腸桿菌最小抑菌濃度的測(cè)定22-24
• 2.2.7 豬源致病性大腸桿菌體外藥敏試驗(yàn)24-25
• 2.2.8 豬源致病性大腸桿菌PMQR基因檢測(cè)25-27
• 2.2.9 豬源致病性大腸桿菌接合實(shí)驗(yàn)27-29
• 3 結(jié)果29-45
• 3.1 豬源大腸桿菌的分離鑒定29-32
• 3.1.1 生化鑒定結(jié)果29-32
• 3.1.2 豬源大腸桿菌的致病性試驗(yàn)32
• 3.2 藥敏試驗(yàn)數(shù)據(jù)32-38
• 3.3 豬源致病性大腸桿菌PMQR耐藥基因的檢測(cè)情況38-40
• 3.3.1 豬源致病性大腸桿菌PMQR基因檢出情況38-39
• 3.3.2 豬源致病性大腸桿菌PMQR耐藥基因凝膠電泳圖39-40
• 3.4 豬源致病性大腸桿菌質(zhì)粒接合試驗(yàn)情況40-45
• 3.4.1 接合子與供體菌耐藥表型對(duì)比結(jié)果41-43
• 3.4.2 接合子菌株P(guān)MQR耐藥基因檢測(cè)結(jié)果43-45
• 4 討論45-48
• 4.1 豬源致病性大腸桿菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果分析45-46
• 4.2 豬源致病性大腸桿菌PMQR基因檢測(cè)分析46-47
• 4.3 接合子與親本菌株耐藥表型及基因型比對(duì)分析47-48
• 5 結(jié)論48-49
• 致謝49-50
• 參考文獻(xiàn)50-57
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文57

【相似文獻(xiàn)】

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8 劉e，

本文編號(hào)：608051