本文關鍵詞：黑龍江地區(qū)豬源致病性大腸桿菌耐藥性分析及PMQR基因檢測

  更多相關文章： 豬源致病性大腸桿菌 多重耐藥 水平傳播 接合子

【摘要】：在一段時間內(nèi),大腸桿菌被視為人和動物正常腸道菌群的組成部分,但后期的研究發(fā)現(xiàn),某些血清型的大腸桿菌對于人和動物卻有病原性,發(fā)生在豬身上則常表現(xiàn)為仔豬黃白痢以及豬水腫病,給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟損失,抗菌藥物因此被廣泛甚至不合理使用,這就導致大腸桿菌耐藥性不斷增強,尤其是多重耐藥現(xiàn)象日益嚴重,同時接合性質(zhì)粒等可移動遺傳元件在耐藥性水平傳播過程中發(fā)揮了重要的作用,使得細菌產(chǎn)生獲得性耐藥性的現(xiàn)象不斷發(fā)生,因此細菌耐藥性分析及水平傳播機制成為了當今相關學科爭相研究的熱點。氟喹諾酮類藥物在養(yǎng)豬業(yè)不斷得到使用,伴隨之而來的耐藥性也逐漸加重,雖然氟喹諾酮耐藥基因一般介導低水平耐藥,但是多種耐藥基因的相互組合,或是與其他耐藥機制的相互作用都可帶來高水平耐藥,甚至達到臨床耐藥。本試驗對分離自黑龍江省部分地區(qū)的致病性大腸桿菌進行了耐藥性分析,同時重點對質(zhì)粒介導的氟喹諾酮耐藥基因進行了檢測,并通過接合試驗,對耐藥性水平傳遞的可能性進行了研究,旨在為該地區(qū)更加合理用藥,以及后期耐藥性的消除提供一定的理論依據(jù)。根據(jù)CLSI標準,本次試驗通過微量肉湯二倍稀釋法測定106株臨床分離致病性菌株對8種常見藥物的最小抑菌濃度(MIC),調(diào)查研究黑龍江省部分地區(qū)的致病性大腸桿菌對8種臨床常見藥物的耐藥情況以及多重耐藥大腸桿菌的檢出率,試驗結果為:106株豬源致病性大腸桿菌對8種獸醫(yī)臨床常用抗菌藥物耐藥率較高,均超過30%,其中對氟苯尼考的耐藥率最高,高達72.64%;其次對頭孢曲松(70.75%)、頭孢噻呋(70.75%)、慶大霉素(66.04%)、阿米卡星(64.15%)耐藥率非常高;對恩諾沙星(56.60%)、環(huán)丙沙星(48.11%)、多西環(huán)素(32.08%)耐藥率也較高,且表現(xiàn)多重耐藥(二重及以上耐藥)的菌株所占比率高達73.58%。本試驗還采用了紙片擴散法,進一步證實了耐藥性數(shù)據(jù)的準確性。本試驗對106株豬源致病性大腸桿菌質(zhì)粒介導的氟喹諾酮耐藥(Plasmid mediated fluoroquinolone resistant,PMQR)基因流行情況進行了檢測,其中oqx AB,qnr S,aac(6’)-Ib-cr,qnr B,qep A的檢出率分別為44.34%,40.57%,14.15%,8.49%,7.55%,而其它基因并沒有檢測到,這表明,現(xiàn)階段PMQR基因分布率已經(jīng)呈現(xiàn)上升趨勢,所造成的直接后果就是用藥療效低,進而由于基因水平傳播造成超級細菌的出現(xiàn)。本試驗還通過接合試驗,對耐藥性水平傳遞的可能性進行了研究,同時通過比較接合前后耐藥表型以及耐藥基因型的變化,探討可移動質(zhì)粒在耐藥性水平傳播過程中所起到的作用,試驗結果如下:41株氟喹諾酮耐藥且PMQR基因陽性的供體菌共接合成功16株細菌,接合成功率高達39%,通過試驗數(shù)據(jù)可以深刻的認識到,一方面必須加大對耐藥基因的監(jiān)測力度;同時另一方面還必須對耐藥基因的水平傳播機制進行研究,以期為新獸藥的研發(fā)以及耐藥性的消除提供一定的理論依據(jù)。
【關鍵詞】：豬源致病性大腸桿菌 多重耐藥 水平傳播 接合子
【學位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S852.612
【目錄】：

• 摘要8-9
• 英文摘要9-11
• 1 前言11-19
• 1.1 大腸桿菌概述11-13
• 1.1.1 大腸桿菌的致病性11-12
• 1.1.2 大腸桿菌的流行性12
• 1.1.3 大腸桿菌的耐藥現(xiàn)狀12-13
• 1.2 氟喹諾酮藥物的應用近況及抗菌作用機制13-14
• 1.2.1 氟喹諾酮藥物的應用近況13-14
• 1.2.2 氟喹諾酮類藥物的抑菌機制14
• 1.3 大腸桿菌對氟喹諾酮類藥物的耐藥情況及耐藥機制14-17
• 1.3.1 大腸桿菌對氟喹諾酮類藥物的耐藥研究現(xiàn)狀14-15
• 1.3.2 大腸桿菌對氟喹諾酮類的耐藥機理15-17
• 1.4 水平基因轉移概述17-18
• 1.5 研究的目的與意義18-19
• 2 材料與方法19-29
• 2.1 試驗材料19-21
• 2.1.1 試驗試劑19
• 2.1.2 主要儀器與設備19-20
• 2.1.3 培養(yǎng)基和常用溶液配制20-21
• 2.2 試驗方法21-29
• 2.2.1 樣本的采集21
• 2.2.2 大腸桿菌的分離培養(yǎng)21
• 2.2.3 大腸桿菌菌株的鑒定21-22
• 2.2.4 大腸桿菌致病性試驗22
• 2.2.5 菌株的儲存22
• 2.2.6 豬源致病性大腸桿菌最小抑菌濃度的測定22-24
• 2.2.7 豬源致病性大腸桿菌體外藥敏試驗24-25
• 2.2.8 豬源致病性大腸桿菌PMQR基因檢測25-27
• 2.2.9 豬源致病性大腸桿菌接合實驗27-29
• 3 結果29-45
• 3.1 豬源大腸桿菌的分離鑒定29-32
• 3.1.1 生化鑒定結果29-32
• 3.1.2 豬源大腸桿菌的致病性試驗32
• 3.2 藥敏試驗數(shù)據(jù)32-38
• 3.3 豬源致病性大腸桿菌PMQR耐藥基因的檢測情況38-40
• 3.3.1 豬源致病性大腸桿菌PMQR基因檢出情況38-39
• 3.3.2 豬源致病性大腸桿菌PMQR耐藥基因凝膠電泳圖39-40
• 3.4 豬源致病性大腸桿菌質(zhì)粒接合試驗情況40-45
• 3.4.1 接合子與供體菌耐藥表型對比結果41-43
• 3.4.2 接合子菌株PMQR耐藥基因檢測結果43-45
• 4 討論45-48
• 4.1 豬源致病性大腸桿菌藥敏試驗結果分析45-46
• 4.2 豬源致病性大腸桿菌PMQR基因檢測分析46-47
• 4.3 接合子與親本菌株耐藥表型及基因型比對分析47-48
• 5 結論48-49
• 致謝49-50
• 參考文獻50-57
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術論文57

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 程紹輝;何紅秋;劉斌;陳慰祖;王存新;;磁珠分離DNA技術檢測HIV-1逆轉錄酶基因耐藥性突變[J];中國生物工程雜志;2008年08期

2 李忠明;分支桿菌的耐藥性機理及其分子生物學檢測方法[J];微生物學免疫學進展;1995年04期

3 遲戈夫;;克雷伯氏菌引起嬰兒腹瀉的病原分離鑒定及耐藥性檢測[J];內(nèi)蒙古民族大學學報(自然科學版);2005年06期

4 陳瑞;唐英春;朱家馨;李建國;彭湘民;;耐亞胺培南銅綠假單胞菌的耐藥性及分子流行病學研究[J];中華醫(yī)院感染學雜志;2006年04期

5 溫旺榮,戴庚孫;念珠菌耐藥性的研究進展[J];國外醫(yī)學.臨床生物化學與檢驗學分冊;2001年01期

6 王朝暉,魏蓮花;290例呼吸道感染患者嗜血桿菌的分離鑒定及耐藥性分析[J];甘肅科技;2003年09期

7 黎麗雯;鄒立扣;周楊;胡蘇;龐玉娟;;成都府河水體細菌動態(tài)變化及耐藥性[J];湖泊科學;2012年01期

8 鄒立扣,王紅寧;基因芯片技術檢測細菌耐藥性的研究進展[J];微生物學雜志;2003年01期

9 吳志明;段建成;周全玲;;河南省畜禽幾種主要致病菌的分離鑒定和耐藥性檢測[J];河南農(nóng)業(yè)科學;2006年01期

10 石桂英;孫宗科;陳西平;;應用基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜檢測細菌耐藥性的初步研究[J];衛(wèi)生研究;2008年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 尚旭明;王海燕;;耐甲氧西林葡萄球菌的耐藥性分析[A];中華醫(yī)學會第七次全國檢驗醫(yī)學學術會議資料匯編[C];2008年

2 李羲;;肺癌耐藥性檢測與克服耐藥性策略[A];中華醫(yī)學會第五屆全國胸部腫瘤及內(nèi)窺鏡學術會議論文匯編[C];2011年

3 張健源;李傳友;程君;;應用改良的耐藥性檢測法觀察結核分枝桿菌耐藥的動態(tài)變化[A];中華醫(yī)學會結核病學分會2010年學術年會論文匯編[C];2010年

4 葉衛(wèi)紅;劉翠銀;;268例革蘭陰性桿菌肺炎的病原菌分布及耐藥性監(jiān)測[A];湖北省暨武漢市微生物學會分析微生物專業(yè)委員會第十屆第五次學術會議論文匯編[C];2008年

5 王春光;張鐵;韓偉;翟向和;李清艷;呂建存;;禽致病性大腸埃希菌的分離鑒定與耐藥性監(jiān)測[A];京津冀畜牧獸醫(yī)科技創(chuàng)新交流會暨新思想、新觀點、新方法論壇論文集[C];2008年

6 管婧;卓超;蘇丹虹;李紅玉;;耐甲氧西林金黃色葡萄球菌耐藥性及基因分型分析[A];第8屆全國抗菌藥物臨床藥理學術會議暨北京大學臨床藥理研究所成立三十周年論文集[C];2010年

7 楊華;胡忠義;;變性高效液相色譜在結核分枝桿菌耐藥性檢測中的應用研究[A];2006中國防癆協(xié)會全國學會會議論文集[C];2006年

8 肖二輝;石娜;陳永平;;2003-2008年我院細菌耐藥性變化的分析[A];2009香港-北京-杭州內(nèi)科論壇暨2009年浙江省內(nèi)科學學術年會論文匯編[C];2009年

9 郭瑞林;蘇冰;王小華;任忠良;張曉雪;;咸陽地區(qū)醫(yī)院細菌感染發(fā)生率與耐藥性監(jiān)測研究[A];中華醫(yī)學會第七次全國檢驗醫(yī)學學術會議資料匯編[C];2008年

10 谷海瀛;;Helicobacter pylori分離培養(yǎng)鑒定分型及耐藥性檢測研究[A];中華醫(yī)學會第七次全國檢驗醫(yī)學學術會議資料匯編[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 北京市結核病胸部腫瘤研究所 韓喜琴;RFP和RBT耐藥性與rpoB突變有關[N];中國醫(yī)藥報;2011年

2 ;中國建立基因型分析方法[N];中國高新技術產(chǎn)業(yè)導報;2002年

3 趙喜明;耐藥細菌叫板聲急[N];中國醫(yī)藥報;2004年

4 于海源;細菌對消毒劑也產(chǎn)生耐藥性[N];中國醫(yī)藥報;2000年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 孫慧涌;自由能計算方法在耐藥性機制分析和遺傳病治療中的應用[D];蘇州大學;2015年

2 孔令聰;牛A型多殺性巴氏桿菌耐藥性分析及對部分常用藥物耐藥機制研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2016年

3 蘇齊鑒;廣西HIV-1耐藥性及關聯(lián)因素研究與主要流行株亞型快速鑒定方法的建立[D];廣西醫(yī)科大學;2009年

4 賈崢;HIV-1表型耐藥以及基因型耐藥的檢測與分析[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2010年

5 王秀英;葡萄提取物消除大腸桿菌耐藥性的研究[D];四川大學;2006年

6 張強;副豬嗜血桿菌喹諾酮耐藥分子特征及豬鏈球菌多重耐藥機制研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 李曉柳;大腸桿菌耐藥性篩選及艾葉、升麻對環(huán)丙沙星耐藥性消除的研究[D];山東中醫(yī)藥大學;2015年

2 李映寰;多重耐藥性大腸桿菌在水體—顆粒物微界面的粘附特征研究[D];北京交通大學;2016年

3 王宏棟;黑龍江地區(qū)豬源致病性大腸桿菌耐藥性分析及PMQR基因檢測[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2016年

4 王梓;牛莢膜血清A型巴氏桿菌氨基糖苷類抗生素耐藥性研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學;2016年

5 張愛民;不同來源乳酸菌的耐藥性分析及藥敏性乳酸菌的應用[D];揚州大學;2008年

6 王彩萍;細菌對中藥中有效成分耐藥性的熱動力學研究[D];曲阜師范大學;2006年

7 王慶福;氟苯尼考殘留對細菌耐藥性的影響[D];西南民族大學;2006年

8 劉e，

本文編號：608051