本文關鍵詞：轉G2-EPSPS基因玉米D-3側翼序列分析與轉化體特異性檢測方法

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【摘要】：通過一次3'端高效熱不對稱交互PCR(hiTAIL-PCR)和一次長鏈PCR擴增方法獲得了轉抗草甘膦基因(G2-EPSPS)玉米品系D-3的外源DNA插入片段的全DNA序列(T-DNA)及兩端側翼序列,并建立了轉化體特異性PCR檢測方法。結果顯示:T-DNA插入片段全長4 318bp,由一個G2-EPSPS基因的表達盒構成。根據(jù)T-DNA 5'、3'端側翼序列設計引物,建立了轉化體特異性檢測方法,并分析了該方法的靈敏度以及檢出限,研究結果表明,3'端定性PCR檢測方法特異性強,靈敏度高,檢出極限為每100ng模板量的0.05%。本研究結果對轉抗草甘膦外源基因檢測和生物安全評價及監(jiān)管具有重要意義。
【作者單位】： 西南科技大學生命科學與工程學院;中國農業(yè)科學院生物技術研究所;四川省農業(yè)科學院生物技術核技術研究所;
【關鍵詞】： 轉基因玉米 G-EPSPS 側翼序列 轉化體特異性檢測
【基金】：轉基因重大專項(2014ZX0800301B) 國家自然科學基金(31370126) 國家“973”計劃(2013CB733903) 國家“863”計劃(2012AA063503)
【分類號】：S513
【正文快照】： 隨著轉基因技術的飛速發(fā)展,轉基因作物的種植面積日益擴大,轉基因作物的不斷商業(yè)化使得大量轉基因產品進入人們的生活[1-2]。轉基因作物專利的保護問題、轉基因產品的標識問題、轉基因作物潛在的生態(tài)安全風險、以及轉基因食品安全問題已引起了政府和民眾的密切關注,因此當前迫，

本文編號：604581