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032基因缺失豬痘病毒載體的構(gòu)建及鑒定

發(fā)布時(shí)間:2017-08-01 12:16

  本文關(guān)鍵詞:032基因缺失豬痘病毒載體的構(gòu)建及鑒定


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【摘要】:目的:構(gòu)建毒力減弱的豬痘病毒載體。方法:以豬痘病毒野生毒株NT1501株為親本毒株,通過(guò)同源重組方法,構(gòu)建缺失032毒力基因的豬痘病毒SPV△032。檢測(cè)SPV△032在不同種屬來(lái)源細(xì)胞系中的培養(yǎng)滴度,并通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)來(lái)檢測(cè)其毒力。結(jié)果:豬痘病毒SPV△032株與野生NT1501株在PK15和ST等豬源細(xì)胞中的培養(yǎng)滴度差異不顯著,均可達(dá)到5.0×106TCID50左右。豬痘病毒SPV△032株在Vero、MDBK等其他物種來(lái)源的細(xì)胞系中不能進(jìn)行復(fù)制,連續(xù)傳代2~3代以后,細(xì)胞培養(yǎng)物中檢測(cè)不到豬痘病毒基因,與野生NT1501株培養(yǎng)結(jié)果一致。動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果表明,用高濃度SPV△032接種實(shí)驗(yàn)豬,接種部位皮膚未出現(xiàn)任何癥狀,比野生NT1501株的毒力顯著降低。接種SPV△032實(shí)驗(yàn)豬的細(xì)胞免疫和體液免疫反應(yīng)水平均顯著高于野生NT1501株(P0.05)。接種SPV△032的實(shí)驗(yàn)豬不會(huì)通過(guò)糞便等途徑向環(huán)境中排毒。結(jié)論:本研究構(gòu)建了032基因缺失豬痘病毒SPV△032,該病毒的毒力與野生NT1501株相比顯著下降,可以作為弱毒豬痘病毒載體,用于獸用疫苗研發(fā)。
【作者單位】: 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】豬痘病毒 基因 載體
【基金】:江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新資金項(xiàng)目(CX(15)1056;CX(16)1028)
【分類(lèi)號(hào)】:S852.65
【正文快照】: 豬痘病毒(Swinepox virus,SPV)是脊椎動(dòng)物痘病毒亞科(Chordopoxvirinae)豬痘病毒屬(Suipoxvirus)的唯一成員[1]。豬是SPV唯一的天然宿主,其他動(dòng)物均不被SPV感染[2]。豬感染SPV后可出現(xiàn)豬痘癥狀,該病于1842年首次在歐洲報(bào)道,目前在全世界范圍內(nèi)流行。SPV在表皮角質(zhì)形成細(xì)胞中增

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1 鄧舜洲;徐昌滿(mǎn);張文波;蔣新華;鄒柳;冷闖;胡楊;朱芝秀;;豬痘病毒江西分離株JX08的分離鑒定[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2014年05期

2 鄧舜洲;蔣新華;冷闖;朱芝秀;鄔向東;戴益民;張文波;;江西部分地區(qū)豬痘病毒PCR檢測(cè)及P35基因的分析[J];動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2013年02期

3 鄧舜洲;蔣新華;冷闖;朱芝秀;何后軍;張文波;;豬痘病毒P35基因的原核表達(dá)及間接ELISA抗體檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2013年10期

4 ;[J];;年期

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1 鄭衛(wèi)軍;如何防治“豬天花”[N];吉林農(nóng)村報(bào);2007年

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1 黃冬艷;表達(dá)豬鏈球菌2型保護(hù)性抗原重組豬痘病毒的構(gòu)建、特性分析及其小鼠免疫評(píng)估[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

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1 蔣新華;江西省豬痘病毒的分離及其分子流行病學(xué)和血清學(xué)調(diào)查[D];江西農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

2 侯昕;表達(dá)豬繁殖與呼吸綜合癥病毒多表位肽重組豬痘病毒的構(gòu)建[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

3 武存霞;豬流行性腹瀉病毒S2基因片段重組豬痘病毒的構(gòu)建和免疫原性分析[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年



本文編號(hào):604189

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