本文關(guān)鍵詞：弓形蟲(chóng)ROP21基因的原核表達(dá)與免疫學(xué)鑒定

  更多相關(guān)文章： 弓形蟲(chóng) 棒狀體蛋白 原核表達(dá) Western blot 納蟲(chóng)空泡

【摘要】：目的原核表達(dá)弓形蟲(chóng)棒狀體ROP21基因,并對(duì)rROP21蛋白進(jìn)行免疫學(xué)鑒定。方法根據(jù)已發(fā)表的ROP21基因序列設(shè)計(jì)引物,通過(guò)RT-PCR方法擴(kuò)增弓形蟲(chóng)RH株的ROP21基因。將ROP21基因克隆到原核表達(dá)載體pET-28a(+)后轉(zhuǎn)化大腸埃希菌BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞,IPTG誘導(dǎo)表達(dá)目的蛋白,純化后進(jìn)行SDS-PAGE分析、Western blot及IFA分析。結(jié)果經(jīng)PCR和酶切鑒定,成功構(gòu)建重組表達(dá)載體。重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化BL21(DE3)后經(jīng)IPTG誘導(dǎo),重組蛋白(rROP21)以包涵體形式高效表達(dá),分子質(zhì)量單位約為45ku。Western blot顯示重組rROP21蛋白能被his標(biāo)簽抗體及弓形蟲(chóng)病患者血清識(shí)別。用rROP21免疫小鼠,獲得滴度為1∶104的抗體血清。IFA顯示弓形蟲(chóng)速殖子體內(nèi)存在ROP21蛋白。結(jié)論構(gòu)建的重組質(zhì)粒pET28a-ROP21表達(dá)的弓形蟲(chóng)rROP21具有抗性,可作為血清學(xué)診斷候選抗原,為進(jìn)一步研究其生物學(xué)功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院山東省寄生蟲(chóng)病防治研究所;臨沂市畜牧局;平邑縣畜牧局;
【關(guān)鍵詞】： 弓形蟲(chóng) 棒狀體蛋白 原核表達(dá) Western blot 納蟲(chóng)空泡
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目(No.31502057)
【分類(lèi)號(hào)】：R382.5
【正文快照】： *?**?剛地弓形蟲(chóng)(Toxoplasma gondii)是一種重要的人畜共患細(xì)胞內(nèi)寄生原蟲(chóng),能感染哺乳動(dòng)物、鳥(niǎo)類(lèi)等所有溫血?jiǎng)游颷1]。弓形蟲(chóng)病呈世界性分布,全球平均人群感染率為20%~30%,我國(guó)人群感染率為5%~20%[2-4]。近年來(lái)寵物飼養(yǎng)數(shù)量增多,使得弓形蟲(chóng)感染率呈逐年上升趨勢(shì),但目前仍缺少治

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 盧慎;先天性弓形蟲(chóng)病腦積水的病理學(xué)研究[J];臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志;1986年04期

2 張述義,于恩庶;我國(guó)弓形蟲(chóng)體外培養(yǎng)的研究進(jìn)展[J];中國(guó)人獸共患病雜志;1992年04期

3 蔣早立,解中堅(jiān);弓形蟲(chóng)病的實(shí)驗(yàn)治療研究概況[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(寄生蟲(chóng)病分冊(cè));1992年05期

4 王寶麟;;弓形蟲(chóng)染色體的研究 弓形蟲(chóng)染色體標(biāo)本制備方法的探討(一)[J];貴州醫(yī)藥;1992年06期

5 毛飛，

本文編號(hào)：580662