本文關鍵詞：貽貝粘蛋白Mgfp-5基因在煙草中的轉化

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【摘要】：貽貝(Mytilus galloprovincialis)足腺分泌的粘蛋白Mgfp-5,是一種粘合強度高、生物相容性好的生物粘合劑,可以廣泛應用于醫(yī)學、化學表面以及海洋工程等領域。天然獲取Mgfp-5時易固化且含量低,難獲得、成本高制約了其應用,所以更多學者嘗試基因工程方法獲得粘蛋白Mgfp-5,其中鮮見借助植物基因工程表達Mgfp-5的報道。本研究構建攜帶Mgfp-5基因的植物表達載體p RI101-Mgfp,以秦煙95煙草葉片為受體,通過根癌農(nóng)桿菌LBA4404介導方法,遺傳轉化外植體,歷經(jīng)轉染、抗性篩選及分子生物學鑒定,獲得轉基因煙草植株。研究表明正確構建的植物表達載體p RI101-Mgfp,可以在外植體預培養(yǎng)3 d,農(nóng)桿菌菌液OD600=0.6,侵染10 min,共培養(yǎng)3 d,20 mg/L卡那霉素抗性篩選培養(yǎng)的條件下,攜帶外源Mgfp-5基因,順利轉化進入煙草小苗,經(jīng)過PCR、RT-PCR檢測目標基因Mgfp-5在轉化小苗基因組中可以整合及表達,得到轉Mgfp-5基因煙草植株,生根后移栽成活。本研究為粘合蛋白Mgfp-5的表達、提取純化及功能等深入研究提供參考,也是優(yōu)質粘合劑粘合蛋白材料獲得的一條新途徑。
【作者單位】： 西北大學生命科學學院/陜西省生物重點實驗室/西部資源與現(xiàn)代生物技術省部共建教育部重點實驗室;
【關鍵詞】： 粘蛋白Mgfp- 根癌農(nóng)桿菌 遺傳轉化 煙草
【基金】：國家自然科學基金(31270411,31572665) 陜西省科技廳社會發(fā)展攻關計劃(2012K12-01-02) 陜西省教育廳專項資金(12JK0827);陜西省教育廳重點實驗室項目(12JS105)共同資助
【分類號】：Q943.2
【正文快照】： Transformation of Mytilus galloprovincialis Foot Protein Type 5(Mgfp-5)Gene in TobaccoLv Yuwei Zhang Yujing Lv Yawei Wang Ruijie Yang Zeshang Wang Yingjuan*College of Life Science,Northwestern University/Shaanxi Provincial Key Laboratory of Biotechnology

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本文編號：579448