本文關(guān)鍵詞：貽貝粘蛋白Mgfp-5基因在煙草中的轉(zhuǎn)化

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【摘要】：貽貝(Mytilus galloprovincialis)足腺分泌的粘蛋白Mgfp-5,是一種粘合強(qiáng)度高、生物相容性好的生物粘合劑,可以廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、化學(xué)表面以及海洋工程等領(lǐng)域。天然獲取Mgfp-5時(shí)易固化且含量低,難獲得、成本高制約了其應(yīng)用,所以更多學(xué)者嘗試基因工程方法獲得粘蛋白Mgfp-5,其中鮮見借助植物基因工程表達(dá)Mgfp-5的報(bào)道。本研究構(gòu)建攜帶Mgfp-5基因的植物表達(dá)載體p RI101-Mgfp,以秦?zé)?5煙草葉片為受體,通過根癌農(nóng)桿菌LBA4404介導(dǎo)方法,遺傳轉(zhuǎn)化外植體,歷經(jīng)轉(zhuǎn)染、抗性篩選及分子生物學(xué)鑒定,獲得轉(zhuǎn)基因煙草植株。研究表明正確構(gòu)建的植物表達(dá)載體p RI101-Mgfp,可以在外植體預(yù)培養(yǎng)3 d,農(nóng)桿菌菌液OD600=0.6,侵染10 min,共培養(yǎng)3 d,20 mg/L卡那霉素抗性篩選培養(yǎng)的條件下,攜帶外源Mgfp-5基因,順利轉(zhuǎn)化進(jìn)入煙草小苗,經(jīng)過PCR、RT-PCR檢測目標(biāo)基因Mgfp-5在轉(zhuǎn)化小苗基因組中可以整合及表達(dá),得到轉(zhuǎn)Mgfp-5基因煙草植株,生根后移栽成活。本研究為粘合蛋白Mgfp-5的表達(dá)、提取純化及功能等深入研究提供參考,也是優(yōu)質(zhì)粘合劑粘合蛋白材料獲得的一條新途徑。
【作者單位】： 西北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院/陜西省生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/西部資源與現(xiàn)代生物技術(shù)省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 粘蛋白Mgfp- 根癌農(nóng)桿菌 遺傳轉(zhuǎn)化 煙草
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31270411,31572665) 陜西省科技廳社會(huì)發(fā)展攻關(guān)計(jì)劃(2012K12-01-02) 陜西省教育廳專項(xiàng)資金(12JK0827);陜西省教育廳重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室項(xiàng)目(12JS105)共同資助
【分類號(hào)】：Q943.2
【正文快照】： Transformation of Mytilus galloprovincialis Foot Protein Type 5(Mgfp-5)Gene in TobaccoLv Yuwei Zhang Yujing Lv Yawei Wang Ruijie Yang Zeshang Wang Yingjuan*College of Life Science,Northwestern University/Shaanxi Provincial Key Laboratory of Biotechnology

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李楠楠;譚亮;王智平;王信超;廖智;;厚殼貽貝足絲黏附蛋白mfp-3重組表達(dá)及黏附功能分析[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2011年09期

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 廖智;李楠楠;王信超;孫敬敬;申望;范美華;石戈;;利用蛋白質(zhì)組學(xué)手段鑒定新型貽貝足絲蛋白[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2012年09期

2 潘齊冬;齊齊;鮑林飛;秦傳利;何建瑜;范美華;廖智;;基于Illumina測序的厚殼貽貝足組織轉(zhuǎn)錄組研究[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2015年08期

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 倪克奉;基于仿生粘附材料的生物催化劑固定化技術(shù)及其應(yīng)用研究[D];華東理工大學(xué);2014年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 廖智;魯濤;李楠楠;徐田軍;王日昕;石戈;;厚殼貽貝(Mytilus coruscus)足絲蛋白mcofp3和mcofp6的cDNA克隆及序列分析[J];海洋與湖沼;2010年05期

2 魯濤;廖智;劉梅;葉茂;譚亮;王日昕;;厚殼貽貝低分子量足絲蛋白的初步鑒定(英文)[J];水生生物學(xué)報(bào);2011年01期

3 李楠楠;石戈;楊宵旭;王智平;廖智;;厚殼貽貝Mytilus coruscus足絲盤及足絲的多巴分析(英文)[J];中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2011年02期

4 張友玉,謝青季,袁玉,姚守拙;溶菌酶在裸金電極和巰基乙酸或正十二硫烷基醇修飾金電極上的吸附[J];應(yīng)用化學(xué);2002年01期

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本文編號(hào)：579448