葡萄風(fēng)信子谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶基因克隆與表達(dá)分析
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【摘要】:以亞美尼亞葡萄風(fēng)信子為材料,利用本課題組前期獲得的葡萄風(fēng)信子轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫(kù),根據(jù)已經(jīng)獲得的葡萄風(fēng)信子GST基因片段,通過PCR技術(shù)克隆得到葡萄風(fēng)信子GST基因的c DNA序列,命名為Ma GST。Ma GST的c DNA全長(zhǎng)為711 bp,開放閱讀框?yàn)?66 bp,編碼221個(gè)氨基酸,推測(cè)蛋白質(zhì)分子量為54.1 k D,理論等電點(diǎn)p I為5.13。利用生物信息分析軟件對(duì)Ma GST基因進(jìn)行同源性比對(duì)和系統(tǒng)進(jìn)化分析表明,結(jié)果顯示該基因編碼的氨基酸具有谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶典型的C端與N端雙結(jié)構(gòu)域,屬于GST Tau家族蛋白;與洋蔥和小麥GST基因的一致性分別為76.72%和62.50%。實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示Ma GST在葡萄風(fēng)信子各組織器官表達(dá)強(qiáng)度相似,屬于組成型表達(dá);水楊酸(SA)可以明顯誘導(dǎo)Ma GST表達(dá),Ma GST對(duì)氯化鈉(Na Cl)應(yīng)答不是很明顯,甚至表達(dá)量有稍微的下調(diào)。
【作者單位】: 西北農(nóng)林科技大學(xué) 旱區(qū)作物逆境生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 農(nóng)業(yè)部西北地區(qū)園藝作物生物學(xué)與種質(zhì)創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 林學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 亞美尼亞葡萄風(fēng)信子 谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶 克隆 熒光實(shí)時(shí)定量PCR 脅迫
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(31170652)
【分類號(hào)】:S682.29
【正文快照】: 谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶(gultathione S transferase,GST)作為一組由多基因編碼的多功能蛋白酶,參與到許多內(nèi)源性或外源性毒素的解毒過程[1]。GST可以催化還原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)與各種親電化合物進(jìn)行親核加成反應(yīng)[2],然后將代謝產(chǎn)物轉(zhuǎn)運(yùn)到液泡內(nèi)從而起到解毒的作用。根據(jù)G
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,本文編號(hào):560891
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