本文關(guān)鍵詞：西葫蘆抗PRSV、CMV遺傳分析和抗性基因初步定位

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【摘要】：番木瓜環(huán)斑病毒西瓜株系(PRSV-w)和黃瓜花葉病毒(CMV)是我國西葫蘆種植過程中危害西葫蘆生產(chǎn)的主要病毒害。分別以純合自交系感病品種葫八父(P1A)和抗病品種08-1(P2A)、感病品種纖一白(P1B)和抗病品種08-13(P2B)構(gòu)建兩個6世代遺傳群體A和B,對西葫蘆PRSV-w、CMV抗性遺傳規(guī)律進行研究。使用732對SSR引物和38對EST-SSR引物,對西葫蘆PRSV-w、CMV抗性位點進行初步定位。研究結(jié)果表明:1、西葫蘆抗PRSV-w抗性性狀是一個受核基因控制的性狀,PRSV-w感病對抗病表現(xiàn)為不完全顯性,是由單基因控制的質(zhì)量性狀。西葫蘆抗CMV抗性性狀也是一個受核基因控制的性狀,CMV感病對抗病表現(xiàn)為不完全顯性,是由單基因控制的質(zhì)量性狀。2.設(shè)計[L9(3)4]正交試驗,獲得最優(yōu)的西葫蘆SSR-PCR體系:15uL體系中Mg2+為1.5mmol/L、Taq酶2.2U、引物0.3umol/L、dNTPs0.3mmol/L,10×Buffer,50ng模板DNA。3.西葫蘆抗PRSV-w的抗性基因初步定位:用732對SSR引物38對EST-SSR引物分別對PRSV-w的A群體父母本及其F2、B群體父母本及其F2的抗感池和CMV的A群體父母本及其F2、B群體父母本及其F2抗感池進行擴增。其中對PRSV-w的擴增結(jié)果中A群體有m162、m140、m29、m112、mc43、mc64和m80這7組引物在抗感池中擴增出多態(tài)性條帶,B群體有m141、m162、m126、m64、p265、p201和m80這7組引物在抗感池中擴增出多態(tài)性條帶。這7組引物經(jīng)F2代單株驗證和連鎖分析,篩選出的標記引物m80和m162西葫蘆抗PRSV-w抗病位點連鎖,遺傳距離3.7cM,獲得的特異性片段約200bp。CMV未能在此批引物中獲得連鎖引物。
【關(guān)鍵詞】：西葫蘆 PRSV-w CMV 遺傳分析 分子標記 連鎖分析
【學(xué)位授予單位】：河北工程大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S642.6
【目錄】：

• 摘要5-6
• Abstract6-9
• 符號及縮略詞表9-10
• 第一章 緒論10-17
• 1.1 西葫蘆概述10
• 1.2 西葫蘆育種進展10-11
• 1.3 西葫蘆主要病毒病11-12
• 1.3.1 葫蘆科的主要病毒病11
• 1.3.2 西葫蘆病毒病11
• 1.3.3 番木瓜環(huán)斑病毒西瓜株系（PRSV-w）11-12
• 1.3.4 黃瓜花葉病毒（CMV）12
• 1.4 分子標記技術(shù)12-15
• 1.4.1 SSR分子標記技術(shù)研究進展13-14
• 1.4.1.1 開發(fā)SSR分子標記的傳統(tǒng)方法13-14
• 1.4.1.2 運用富集技術(shù)篩選SSR分子標記14
• 1.4.1.3 運用PCR技術(shù)開發(fā)SSR分子標記14
• 1.4.2 PCR技術(shù)14-15
• 1.4.3 分子標記輔助選擇15
• 1.5 研究目的及意義15-17
• 第二章 西葫蘆抗PRSV-w、CMV遺傳規(guī)律研究17-23
• 2.1 材料和方法17-21
• 2.1.1 試驗材料17-18
• 2.1.2 種子處理18
• 2.1.3 病毒擴繁18
• 2.1.4 病毒接種18-19
• 2.1.5 PRSV-w和CMV單株發(fā)病分級標準：19-21
• 2.2 結(jié)果與分析21-22
• 2.3 討論22-23
• 第三章 西葫蘆SSR-PCR反應(yīng)體系優(yōu)化23-29
• 3.1 試驗材料23
• 3.1.1 西葫蘆材料23
• 3.1.2 儀器和藥品23
• 3.2 試驗方法23-24
• 3.2.1 主要試驗試劑的配制23-24
• 3.2.2 西葫蘆DNA提取方法24
• 3.3 SSR-PCR反應(yīng)體系優(yōu)化24-27
• 3.3.1 西葫蘆DNA提取質(zhì)量檢測24
• 3.3.2 SSR-PCR反應(yīng)體系優(yōu)化24-25
• 3.3.3 電泳結(jié)果分析25-27
• 3.3.3.1 Acr-bis膠的制備25-26
• 3.3.3.2 電泳26
• 3.3.3.3 固定、銀染、顯色26-27
• 3.4 結(jié)果與分析27-28
• 3.5 討論28-29
• 第四章 西葫蘆抗PRSV-w、CMV的SSR引物篩選29-34
• 4.1 試驗材料29
• 4.1.1 西葫蘆材料29
• 4.1.2 儀器和藥品29
• 4.2 試驗方法29
• 4.2.1 引物29
• 4.2.2 西葫蘆DNA提取方法(堿裂解法)29
• 4.2.3 F_2DNA池的構(gòu)建29
• 4.3 結(jié)果與分析29-32
• 4.3.1 SSR標記在A群體和B群體父母本中的差異29-30
• 4.3.2 F_2多態(tài)性SSR標記篩選30-32
• 4.3.3 SSR分子標記在F_2中的連鎖分析32
• 4.4 討論32-34
• 結(jié)論34-35
• 致謝35-36
• 參考文獻36-40
• 作者簡介40-41

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 鄭志強;;西葫蘆病毒病的發(fā)生與防治[J];現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技;2015年08期

2 羅兵;孫海燕;徐港明;揚志剛;沈宗根;顧雯雯;高陽;鄭佳亮;;SSR分子標記研究進展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年12期

3 羅冉;吳委林;張e，

本文編號：541640