本文關(guān)鍵詞：中華蜜蜂信息素結(jié)合蛋白OBP10的基因克隆、原核表達(dá)和配基結(jié)合特性分析

  更多相關(guān)文章： 中華蜜蜂 信息素結(jié)合蛋白 信息素 熒光競(jìng)爭(zhēng) 結(jié)合特性

【摘要】：【目的】氣味結(jié)合蛋白在中華蜜蜂Apis cerana cerana嗅覺系統(tǒng)中起到重要作用,本實(shí)驗(yàn)擬研究中華蜜蜂一個(gè)新的信息素結(jié)合蛋白OBP10及其與蜜蜂信息素以及蜜源開花植物揮發(fā)物的結(jié)合特性。【方法】本實(shí)驗(yàn)通過(guò)RT-PCR擴(kuò)增獲得OBP10基因全長(zhǎng)(Gen Bank登錄號(hào):KP717060.1),以p ET-30a構(gòu)建原核表達(dá)載體,并以Ni2+瓊脂糖柱進(jìn)行重組蛋白表達(dá)和分離純化,在N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN)作為熒光報(bào)告子下利用熒光光譜法體外研究重組Acer OBP10與多種候選化學(xué)配基的結(jié)合特征�！窘Y(jié)果】經(jīng)多序列聯(lián)配分析,發(fā)現(xiàn)Acer OBP10的多個(gè)同源基因均為信息素結(jié)合蛋白(pheromone binding proteins,PBPs)。配基結(jié)合特性分析顯示,Acer OBP10對(duì)14種候選配基中的蜂王信息素成分對(duì)羥基苯甲酸甲酯(HOB)競(jìng)爭(zhēng)力最大,相對(duì)熒光可降至6.06%,解離常數(shù)11.04μmol/L;進(jìn)一步表明Acer OBP10屬于一個(gè)新的中蜂PBPs。此外,Acer OBP10也能和包括工蜂信息素(香葉醇和橙花醇)、報(bào)警信息素(2-庚酮和乙酸異戊酯)等蜜蜂信息素以及蜜源開花植物揮發(fā)物之一的β-紫羅蘭酮結(jié)合,表明Acer OBP10可能是一種以信息素結(jié)合為主的多功能結(jié)合蛋白。【結(jié)論】Acer OBP10是中蜂一個(gè)新的信息素結(jié)合蛋白,與此前我們鑒定的蜂王信息素結(jié)合蛋白Acer ASP1相比,Acer OBP10對(duì)蜜蜂信息素的結(jié)合譜更為廣泛,這些結(jié)果將對(duì)進(jìn)一步研究中華蜜蜂信息素識(shí)別和傳遞提供理論基礎(chǔ),對(duì)于深入了解中華蜜蜂嗅覺影響生理功能的行為機(jī)制具有重要意義。
【作者單位】： 中國(guó)計(jì)量學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院浙江省生物計(jì)量及檢疫檢驗(yàn)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 中華蜜蜂 信息素結(jié)合蛋白 信息素 熒光競(jìng)爭(zhēng) 結(jié)合特性
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31372254) 中國(guó)博士后科學(xué)基金(2014M560488,2015T80624) 杭州市科技計(jì)劃項(xiàng)目(20140432B12)
【分類號(hào)】：Q966
【正文快照】： Molecular cloning,prokaryotic expression and lignand-bindingcharacterization of a novel pheromone binding protein OBP10 in Apiscerana cerana(Hymenoptera:Apidae)靈敏的嗅覺系統(tǒng)在昆蟲覓食、尋偶、交配、種群管理等活動(dòng)中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。其中氣味結(jié)合蛋白(odo

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 朱彬彬,姜勇,雷朝亮;昆蟲信息素結(jié)合蛋白的研究概況[J];昆蟲知識(shí);2005年03期

2 錢荷英;徐安英;;昆蟲信息素結(jié)合蛋白研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)學(xué)通報(bào);2007年23期

3 李紅亮;高其康;程家安;;中華蜜蜂信息素結(jié)合蛋白ASP1 cDNA的克隆及時(shí)空表達(dá)[J];昆蟲學(xué)報(bào);2008年07期

4 龔達(dá)平;趙萍;林英;張輝潔;夏慶友;向仲懷;;家蠶信息素結(jié)合蛋白BmPBP2和BmPBP3基因的初步鑒定及表達(dá)分析[J];昆蟲學(xué)報(bào);2006年03期

5 孫浩;舒茂;趙雷修;周凡蕊;;棉紅鈴蟲信息素結(jié)合蛋白的同源模建[J];環(huán)境昆蟲學(xué)報(bào);2013年06期

6 ;[J];;年期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 劉曉光;安世恒;羅梅浩;郭線茹;原國(guó)輝;;煙夜蛾信息素結(jié)合蛋白3的cDNA克隆、序列分析與原核表達(dá)[A];中國(guó)生態(tài)學(xué)會(huì)2006學(xué)術(shù)年會(huì)論文薈萃[C];2006年

2 劉建兵;;昆蟲信息素結(jié)合蛋白的研究進(jìn)展[A];華中三�。ê幽�、湖北、湖南）昆蟲學(xué)會(huì)2006年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2006年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 郭梅;蝗蟲離子型受體和信息素結(jié)合蛋白的鑒定及功能研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 趙驍;蘋果蠢蛾成蟲觸角感器超微結(jié)構(gòu)及信息素結(jié)合蛋白基因的克隆與序列分析[D];西北農(nóng)林科技大學(xué);2012年

2 董海波;稻縱卷葉螟信息素結(jié)合蛋白基因的克隆與分析[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：中華蜜蜂信息素結(jié)合蛋白OBP10的基因克隆、原核表達(dá)和配基結(jié)合特性分析

  更多相關(guān)文章： 中華蜜蜂 信息素結(jié)合蛋白 信息素 熒光競(jìng)爭(zhēng) 結(jié)合特性

，

本文編號(hào)：513250