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龍葵E2泛素結(jié)合酶基因SorUBC克隆及表達(dá)特性分析

發(fā)布時間:2017-07-02 22:09

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【摘要】:對龍葵Sor UBC基因克隆并分析其在多種非生物脅迫處理下表達(dá)特性,為E2泛素結(jié)合酶在植物逆境脅迫中應(yīng)用提供理論依據(jù)。試驗采用電子克隆結(jié)合RT-PCR方法從龍葵中克隆得到泛素E2結(jié)合酶UBC基因編碼區(qū)序列,命名為Sor UBC,登陸Gen Bank,編號:KU233684。Sor UBC基因編碼區(qū)全長888 bp,編碼295個氨基酸。進(jìn)化樹分析顯示,該基因編碼氨基酸序列與馬鈴薯、番茄同源性最高,為95%,其次是煙草,為91%。該蛋白在第266~284氨基酸位具有1個跨膜螺旋區(qū)域,泛素化位點預(yù)測表明其含有8個泛素化位點。利用熒光定量PCR技術(shù)分析Sor UBC基因在龍葵各器官表達(dá)特征和不同非生物脅迫處理下(干旱、鹽、堿、高溫和低溫)根部和葉片表達(dá)特性,同時測定龍葵葉片生理響應(yīng)。結(jié)果表明,SorU BC基因表達(dá)具有組織差異性,在葉片和果實中表達(dá)量較高。非生物脅迫處理(干旱、鹽、堿、高溫和低溫)后根部和葉片基因表達(dá)情況顯示該基因存在早期(3或5 h)應(yīng)答上調(diào)表達(dá),且根部與葉片基因表達(dá)量和變化趨勢差異顯著,根部表達(dá)量變化比葉片顯著,推測Sor UBC基因在龍葵早期響應(yīng)干旱、鹽、堿、高溫和低溫非生物脅迫中起調(diào)控作用。生理特征數(shù)據(jù)表明,在干旱、鹽和高溫脅迫中龍葵葉片MDA含量變化差異不顯著,POD和SOD活性總體呈先降后升趨勢,說明其在脅迫后期(9 h)對活性氧造成的損傷起緩解作用。
【作者單位】: 哈爾濱師范大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院植物生物學(xué)黑龍江省高校重點實驗室;黑龍江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝分院;
【關(guān)鍵詞】龍葵 SorUBC 克隆 表達(dá)分析 非生物脅迫 生理特性
【基金】:黑龍江省教育廳面上項目(12531204,12531178) “植物生物學(xué)”黑龍江省高校重點實驗室開放課題(ZK201205) 哈爾濱師范大學(xué)青年學(xué)術(shù)骨干資助計劃項目(KGB201218)
【分類號】:Q943.2
【正文快照】: 龍葵(Solanum nigrum L.)為茄科一年生草本植物,在中國分布廣泛,富含生物堿,全株入藥,且抗性較強,是我國發(fā)現(xiàn)的Cd超積累植物[1-2],無論苗期或成熟期,均表現(xiàn)鎘超積累植物具備的積累性和耐性特征[3],是一種具有重金屬修復(fù)潛力的野生植物資源。龍葵干旱適應(yīng)性強[4],生長期極少有

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