陸川豬肌細胞生成素基因的克隆及序列分析
發(fā)布時間:2017-07-02 14:15
本文關(guān)鍵詞:陸川豬肌細胞生成素基因的克隆及序列分析,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:為了獲得廣西陸川豬肌細胞生成素(MyoG)基因編碼區(qū)序列(CDS),試驗采集11月齡陸川豬背最長肌,提取其總RNA并反轉(zhuǎn)錄c DNA,通過RT-PCR方法擴增出MyoG基因CDS,純化、回收擴增產(chǎn)物,與p MD18-T載體進行連接,并與大腸桿菌DH5α感受態(tài)細胞進行轉(zhuǎn)化,將含有重組質(zhì)粒的菌液送到生物公司測定序列,最后用生物軟件進行序列分析。結(jié)果表明:成功擴增獲得了廣西陸川豬MyoG基因CDS長度675 bp,與Gen Bank報道的野豬同源性達到99.9%,與藏豬同源性為99.6%,與五指山豬、延安豬、榮昌豬、梅山豬的同源性為99.6%以上。與其他豬CDS相比較發(fā)現(xiàn),陸川豬MyoG基因CDS第642位點存在T→C,并發(fā)現(xiàn)堿基C是其特有的,但是沒有導致氨基酸突變。構(gòu)建MyoG基因系統(tǒng)進化樹,與陸川豬遺傳距離最近的是藏豬,最遠是褐家鼠。陸川豬MyoG蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)包含1個環(huán)、2個螺旋。說明豬MyoG基因高度保守,今后在進行陸川豬肌肉生長發(fā)育的研究中,可將MyoG基因作為主要候選基因之一。
【作者單位】: 廣西大學動物科學技術(shù)學院;
【關(guān)鍵詞】: 陸川豬 肌細胞生成素(MyoG)基因 克隆 序列分析 蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)
【基金】:廣西自然科學基金項目(2013GXNSFBA019077) 廣西高?蒲幸话沩椖(2013YB004) 廣西博士后專項資助項目(Y334001902;Y334002005)
【分類號】:S828;Q78
【正文快照】: 肌細胞生成素(Myogenin,Myo G)基因是生肌調(diào)節(jié)因子家族(Myogenic regulatory factors,MRFs)中唯一在所有骨骼肌細胞系均可表達的基因,該基因通過調(diào)控成肌細胞的起始融合和肌纖維細胞的形成,在肌肉分化中發(fā)揮關(guān)鍵作用[1-2]。已有學者成功克隆出松江鱸[3]、湖羊[2]、成都麻羊[4]
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本文編號:510240
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