本文關(guān)鍵詞：中國水仙NtFT2正義基因表達載體的構(gòu)建與愈傷組織遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：構(gòu)建中國水仙Nt FT2正義基因表達載體,為進一步研究Nt FT2基因?qū)χ袊裳啃菝哒{(diào)控作用提供參考;建立中國水仙愈傷組織遺傳轉(zhuǎn)化體系,為中國水仙愈傷組織遺傳轉(zhuǎn)化提供技術(shù)平臺。筆者以中國水仙主芽為材料,通過PCR擴增獲得Nt FT2基因;通過PCR、雙酶切、連接等方法將Nt FT2基因正向插入到p CAMBIA1301雙GUS植物表達載體構(gòu)建Nt FT2正義基因表達載體P1301-FT2,再通過凍融法將重組質(zhì)粒P1301-FT2導入根癌農(nóng)桿菌。采用根癌農(nóng)桿菌介導法將Nt FT2正義基因轉(zhuǎn)化中國水仙愈傷組織,采用GUS組織化學染色法檢測中國水仙愈傷組織遺傳轉(zhuǎn)化效率。結(jié)果表明,試驗成功構(gòu)建了中國水仙Nt FT2正義基因表達載體P1301-Nt FT2;中國水仙愈傷組織與0.5 mol/L甘露醇共培養(yǎng)6 h后,置于1.0 OD600的農(nóng)桿菌重懸液中侵染20 min,在25℃、黑暗條件下,共培養(yǎng)6天,其GUS瞬時表達率達到64.28%。構(gòu)建了中國水仙Nt FT2正義基因表達載體,建立了高效的中國水仙愈傷組織遺傳轉(zhuǎn)化體系。
【作者單位】： 泉州師范學院資源與環(huán)境科學學院;福建農(nóng)林大學園藝產(chǎn)品貯運保鮮研究所;
【關(guān)鍵詞】： 中國水仙 NtFT基因 愈傷組織 遺傳轉(zhuǎn)化
【基金】：國家十一五科技支撐計劃項目“臺灣農(nóng)業(yè)新品種、新技術(shù)引進創(chuàng)新研究與示范”(2007BAD07B01) 福建農(nóng)林大學創(chuàng)新團隊項目“園藝植物種質(zhì)與高優(yōu)生產(chǎn)技術(shù)創(chuàng)新”(cxtd12013)
【分類號】：S682.21
【正文快照】： 0引言為進一步研究Nt FT2基因?qū)χ袊裳啃菝哒{(diào)控作用提供參考,為中國水仙愈傷組織遺傳轉(zhuǎn)化提供技術(shù)平臺。良好的遺傳轉(zhuǎn)化體系是遺傳轉(zhuǎn)化成功的決定因素之一,而根癌農(nóng)桿菌介導法是遺傳轉(zhuǎn)化的首選方法[1]。中國水仙遺傳轉(zhuǎn)化主要采用根癌農(nóng)桿菌法介導轉(zhuǎn)化帶盤鱗莖[2-5]或愈傷

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