本文關(guān)鍵詞：FSHβ基因啟動(dòng)子多態(tài)性與多囊卵巢綜合征的相關(guān)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景多囊卵巢綜合癥(PCOS),是女性患者中常見(jiàn)的內(nèi)分泌疾病,其常伴有持續(xù)不排卵、胰島素抵抗以及高雄激素血癥。表現(xiàn)為與遺傳因素、易感因素、環(huán)境因素等多個(gè)因素相關(guān)的復(fù)雜的發(fā)病機(jī)制。目前FSHβ亞基的啟動(dòng)子區(qū)域-211G-T突變的研究表明可能與體內(nèi)FSH水平存在相關(guān)。由于FSH在卵巢功能紊亂的發(fā)病中的重要性,且目前沒(méi)有進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)研究證明FSHB-211G-T突變與PCOS相關(guān)。因此可以通過(guò)獲取啟動(dòng)子序列并構(gòu)建重組質(zhì)粒通過(guò)熒光素酶表達(dá)效率變化,從FSH的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)等因素來(lái)進(jìn)一步研究證實(shí)證實(shí)FSHB基因多態(tài)性與PCOS的相關(guān)性。目的克隆人卵泡刺激素β亞基(Follicle Stimulating Hormone β-subunit, FSHB)的啟動(dòng)子；構(gòu)建FSHB啟動(dòng)子的報(bào)告基因載體并進(jìn)行活性分析。方法設(shè)計(jì)合成FSHβ啟動(dòng)子引物,采用PCR技術(shù)從人基因組DNA中擴(kuò)增FSHβ啟動(dòng)子；將擴(kuò)增片段插入載體并利用酶切與測(cè)序進(jìn)行鑒定；亞克隆該基因至pGL6-TA熒光報(bào)告基因載體；瞬時(shí)轉(zhuǎn)染進(jìn)Hela細(xì)胞,收集細(xì)胞液后,用熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)檢測(cè)報(bào)告基因載體的活性。結(jié)果PCR擴(kuò)增得到人FSHβ基因啟動(dòng)子；成功構(gòu)建pGL6-TA-FSHB-promoter報(bào)告基因載體,測(cè)序結(jié)果表明啟動(dòng)子序列正確；報(bào)告基因載體通過(guò)熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)證實(shí)具有活性。通過(guò)熒光素酶相對(duì)表達(dá)效率比較,在Hela細(xì)胞的體外實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),FSHB-211G→T突變后熒光素酶表達(dá)具有更高的效率并具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P0.05。結(jié)論成功地克隆了人FSHB基因啟動(dòng)子基因序列,報(bào)告基因載體的構(gòu)建,繼續(xù)研究FSHB轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)等有了理論和技術(shù)的基礎(chǔ)。FSHβ啟動(dòng)子的-211G-T可能與PCOS發(fā)病有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：多囊卵巢綜合征 卵泡刺激素 單核苷酸多態(tài)性 熒光素酶表達(dá)效率
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R711.75
【目錄】：

• 英文縮略語(yǔ)表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 1. 引言10-12
• 2. 實(shí)驗(yàn)材料與方法12-32
• 2.1 實(shí)驗(yàn)試劑12-14
• 2.2 實(shí)驗(yàn)儀器14-15
• 2.3 分析軟件及電子數(shù)據(jù)庫(kù)查詢信息15
• 2.4 實(shí)驗(yàn)方法與步驟15-32
• 2.5 統(tǒng)計(jì)分析32
• 3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-35
• 4. 討論35-39
• 5. 優(yōu)勢(shì)及不足39
• 6. 結(jié)論39-40
• 7. 參考文獻(xiàn)40-44
• 附錄44-45
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷44
• 在讀期間發(fā)表論文44-45
• 致謝45-46
• 課題綜述 多囊卵巢綜合癥相關(guān)基因多態(tài)性研究進(jìn)展46-53
• 參考文獻(xiàn)50-53

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本文編號(hào)：507209