本文關(guān)鍵詞：BMPR-IB基因的克隆及其在絨山羊成纖維細胞中的表達，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本研究旨在克隆BB基因型小尾寒羊的BMPR-IB基因編碼區(qū),構(gòu)建重組載體,瞬時轉(zhuǎn)染絨山羊成纖維細胞,并對BMPR-IB等基因的表達情況進行檢測。采用RT-PCR方法擴增BMPR-IB基因完整編碼區(qū),構(gòu)建真核表達載體pEGFP-BMPR-IB,經(jīng)脂質(zhì)體Lipofectamine LTXPLUS介導(dǎo)轉(zhuǎn)染絨山羊成纖維細胞,并分別于轉(zhuǎn)染后48和72h收集細胞,分別提取RNA和蛋白,利用RT-PCR和Western blot方法檢測相關(guān)基因的表達情況。結(jié)果擴增得到了包含BMPR-IB基因完整編碼區(qū)全長在內(nèi)的1 550bp片段,與已知序列高度同源;Real-time PCR檢測結(jié)果均表明,轉(zhuǎn)基因組細胞中BMPR-IB表達量顯著高于空白對照組(P0.01),IGF-Ⅰ基因表達量也顯著上調(diào)(P0.01),TLR4、IFN、MHC、PNRP、GDF5、INH基因的表達量顯著降低(P0.01);Western blot檢測表明,轉(zhuǎn)染組BMPR-IB、IGF-I的表達有所增加,BMP4、TLR4的表達略有降低,但差異均不顯著(P0.05)。本研究成功實現(xiàn)了小尾寒羊BMPR-IB基因在山羊成纖維細胞中的表達,為轉(zhuǎn)BMPR-IB基因陽性細胞株和細胞系的建立提供了基礎(chǔ);研究表明BMPR-IB(BB型)基因的過表達能上調(diào)IGF-Ⅰ基因的表達,下調(diào)TLR4基因的表達。
【作者單位】： 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院;河北省畜牧獸醫(yī)研究所;
【關(guān)鍵詞】： BMPR-IB基因 真核表達載體 絨山羊成纖維細胞 表達
【基金】：國家肉羊產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系資助項目(CARS-39)
【分類號】：S827
【正文快照】： FecB基因最早是在澳大利亞Booroola羊中發(fā)現(xiàn)的一個與高繁殖率相關(guān)的主效基因,能顯著提高羊的繁殖率。后來的研究證明FecB基因的本質(zhì)為骨形態(tài)蛋白Ⅰ型受體基因(Bone morphogeneticprotein receptor-IB,BMPR-IB)。BMPR-IB基因?qū)儆谵D(zhuǎn)移生長因子β亞基(TGF-β)受體家族成員,存在于

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本文編號：504110