本文關(guān)鍵詞：通用引物多重PCR新技術(shù)對番木瓜轉(zhuǎn)基因成分檢測的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：為了滿足能夠同時(shí)對多個(gè)靶標(biāo)進(jìn)行檢測,克服傳統(tǒng)多重PCR的引物間排斥、重現(xiàn)性差等缺點(diǎn)的要求,建立通用引物多重PCR新方法對番木瓜中轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行高效、快速的檢測。選用三種轉(zhuǎn)基因番木瓜(Event 55-1、"GM-YK"和"華農(nóng)一號")和非轉(zhuǎn)基因番木瓜("臺(tái)農(nóng)2號")的新鮮葉片為研究對象,根據(jù)三種轉(zhuǎn)基因番木瓜的外源基因和內(nèi)標(biāo)木瓜蛋白酶基因(papain)序列,設(shè)計(jì)五種特異性引物。通過比較不加入接頭的特異性引物的PCR驗(yàn)證結(jié)果,發(fā)現(xiàn)復(fù)合引物(帶通用接頭的引物)無論在單重PCR或者多重PCR的檢測中的電泳條帶均更為明亮清晰。而由靈敏度的對比,可以得出通用引物多重PCR靈敏度比普通引物的靈敏度提高了1個(gè)數(shù)量級。通用引物多重PCR新技術(shù)較普通多重PCR方法檢測番木瓜中轉(zhuǎn)基因成分擁有更低的檢測限和靈敏度,為轉(zhuǎn)基因成分的快速檢測提供一種新技術(shù)。
【作者單位】： 暨南大學(xué)食品科學(xué)與工程系;廣東工業(yè)大學(xué)輕工化工學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 轉(zhuǎn)基因 檢測 多重PCR 通用引物
【基金】：十二五國家科技支撐課題(2012BAD36B04) 廣東高校優(yōu)秀青年創(chuàng)新人才培育項(xiàng)目(LYM10033) 暨南大學(xué)科研培育與創(chuàng)新基金(21609418)
【分類號】：TS255.7
【正文快照】： 番木瓜廣泛存在于熱帶、亞熱帶地區(qū),富含維生素A、維生素和β-胡蘿卜素[1],不僅可以食用,還廣泛地應(yīng)用于醫(yī)藥,食品以及其它工業(yè)領(lǐng)域[2]。然而,番木瓜環(huán)斑病毒Papaya ring spot virus(PRSV)的出現(xiàn),對其規(guī)模化種植造成了巨大的威脅,極大地影響了番木瓜的市場經(jīng)濟(jì)效益[3]。1998年

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