通用引物多重PCR新技術對番木瓜轉基因成分檢測的研究
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【摘要】:為了滿足能夠同時對多個靶標進行檢測,克服傳統(tǒng)多重PCR的引物間排斥、重現(xiàn)性差等缺點的要求,建立通用引物多重PCR新方法對番木瓜中轉基因成分進行高效、快速的檢測。選用三種轉基因番木瓜(Event 55-1、"GM-YK"和"華農一號")和非轉基因番木瓜("臺農2號")的新鮮葉片為研究對象,根據(jù)三種轉基因番木瓜的外源基因和內標木瓜蛋白酶基因(papain)序列,設計五種特異性引物。通過比較不加入接頭的特異性引物的PCR驗證結果,發(fā)現(xiàn)復合引物(帶通用接頭的引物)無論在單重PCR或者多重PCR的檢測中的電泳條帶均更為明亮清晰。而由靈敏度的對比,可以得出通用引物多重PCR靈敏度比普通引物的靈敏度提高了1個數(shù)量級。通用引物多重PCR新技術較普通多重PCR方法檢測番木瓜中轉基因成分擁有更低的檢測限和靈敏度,為轉基因成分的快速檢測提供一種新技術。
【作者單位】: 暨南大學食品科學與工程系;廣東工業(yè)大學輕工化工學院;
【關鍵詞】: 轉基因 檢測 多重PCR 通用引物
【基金】:十二五國家科技支撐課題(2012BAD36B04) 廣東高校優(yōu)秀青年創(chuàng)新人才培育項目(LYM10033) 暨南大學科研培育與創(chuàng)新基金(21609418)
【分類號】:TS255.7
【正文快照】: 番木瓜廣泛存在于熱帶、亞熱帶地區(qū),富含維生素A、維生素和β-胡蘿卜素[1],不僅可以食用,還廣泛地應用于醫(yī)藥,食品以及其它工業(yè)領域[2]。然而,番木瓜環(huán)斑病毒Papaya ring spot virus(PRSV)的出現(xiàn),對其規(guī)模化種植造成了巨大的威脅,極大地影響了番木瓜的市場經(jīng)濟效益[3]。1998年
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本文編號:500588
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