人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體基因植物表達(dá)載體的構(gòu)建及瞬時(shí)表達(dá)
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【摘要】:人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體具有特異性誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞凋亡而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒性的特點(diǎn),被認(rèn)為是腫瘤凋亡療法較有希望的候選藥物。植物生物反應(yīng)器在藥用蛋白質(zhì)生產(chǎn)方面具備較大優(yōu)勢(shì)。構(gòu)建了可溶性人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體基因的植物表達(dá)載體,進(jìn)行本氏煙(Nicotiana benthamiana)瞬時(shí)表達(dá),并對(duì)目的蛋白的體外活性進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示,本氏煙葉片中目的蛋白平均表達(dá)量為68.60 pg/mg TSP;在濃度為200 pg/m L時(shí),對(duì)NCI-H460細(xì)胞株的抑制率為28.75%。研究表明,經(jīng)密碼子優(yōu)化的編碼基因能夠在受體植物中表達(dá)出有活性的目的蛋白,為開(kāi)展目的基因的穩(wěn)定轉(zhuǎn)化工作奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)研究所;河南科技學(xué)院生命科技學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體 本氏煙 瞬時(shí)表達(dá) 表達(dá)量 生物學(xué)活性
【基金】:國(guó)家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(xiàng)(2012ZX08005-004)資助
【分類號(hào)】:R730.2
【正文快照】: 人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)最早發(fā)現(xiàn)于1995年[1,2],屬于腫瘤壞死因子超家族成員;其單體(monomer)的全長(zhǎng)為281 aa,理論分子量為32.50 k Da,等電點(diǎn)(isoelectric point,p I)為7.63,是一種Ⅱ型跨膜蛋白。研究表明,h TRAIL能特
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