單增李斯特菌膜裂解相關基因缺失突變株的構建及生物學特性鑒定
發(fā)布時間:2017-06-26 09:19
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【摘要】:擬探明單核細胞增多性李斯特菌(單增李斯特菌)分離株M7可能的低致病力機制。利用SOE-PCR及同源重組法構建M7膜裂解相關基因hly及plcB單缺失(M7-Δhly和M7-ΔplcB)及雙缺失突變株(M7-Δhly/plcB),比較它們與親本株的生物學特性差異。結果如下:PCR及反轉錄PCR表明突變株構建成功。突變株M7-Δhly和M7-Δhly/plcB因hly缺失致其溶血活性喪失。plcB缺失突變株M7-ΔplcB和M7-Δhly/plcB無可見溶脂活性。單缺失突變株M7-ΔplcB、M7-Δhly與M7具有相似的細胞黏附及增殖能力(P0.05)。MOI為1 000時,雙缺失突變株M7-Δhly/plcB對Caco-2細胞毒性最低(11.10%),M7-Δhly次之(23.53%)(P0.05)?瞻咴囼灡砻骶闙7和M7-ΔplcB僅能在無慶大霉素培養(yǎng)基中形成空斑。hly及plcB缺失致單增李斯特菌對免疫抑制小鼠毒力降低。單增李斯特菌M7低致病力可能與hly及plcB的高水平表達有關,致細菌對宿主細胞毒性增強而從細胞內逸出,使其不能躲避宿主免疫系統(tǒng)而被清除。
【作者單位】: 寧波衛(wèi)生職業(yè)技術學院;浙江萬里學院;舟山出入境檢驗檢疫局;浙江大學動物預防醫(yī)學研究所;
【關鍵詞】: 單增李斯特菌 膜裂解相關基因 細胞毒性 生物學特性
【基金】:浙江省科技廳公益技術研究農(nóng)業(yè)項目(2014C32047) 2015年度留學人員科技活動項目擇優(yōu)資助經(jīng)費項目 浙江萬里學院省重中之重學科開放基金(KF2014007) 寧波市自然科學基金(2015A610189) 浙江檢驗檢疫局重點科研項目(2014-ZKZ-017)
【分類號】:R378.994
【正文快照】: 3.舟山出入境檢驗檢疫局,舟山316000;4.浙江大學動物預防醫(yī)學研究所,杭州310058)單核細胞增多性李斯特菌(簡稱單增李斯特菌)為重要的食源性病原菌,可致胃腸炎、敗血癥、腦炎和腦膜炎,老人、兒童和免疫抑制人群最易感,孕婦感染后致流產(chǎn)。雖然發(fā)生率不高,但死亡率較高[1]。單增
【相似文獻】
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8 張?zhí)m榮;唐一清;甄博s
本文編號:485629
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