本文關(guān)鍵詞：魚腥藻PCC7120基因alr0267敲除及其功能的初步研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【目的】敲除魚腥藻PCC 7120的alr0267基因,并對(duì)其功能進(jìn)行初步研究。【方法】克隆獲得魚腥藻PCC 7120 alr0267基因部分片段,通過(guò)構(gòu)建敲除載體,使其與目的基因發(fā)生單交換同源重組,從而將魚腥藻PCC 7120中的alr0267基因敲除,并對(duì)敲除體進(jìn)行純化和PCR鑒定,然后對(duì)alr0267敲除體和野生型固氮異形胞進(jìn)行形態(tài)觀察和統(tǒng)計(jì),同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR,在培養(yǎng)不同時(shí)間(0,3,8,24h和10d)檢測(cè)野生型和alr0267基因敲除體中與異形胞功能相關(guān)基因all0813、all2736、alr2887的相對(duì)表達(dá)量。【結(jié)果】魚腥藻PCC 7120 alr0267基因被成功敲除;在缺氮條件下培養(yǎng)6~12d,敲除體異形胞營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞數(shù)的均值明顯少于野生型;實(shí)時(shí)定量PCR分析表明,野生型中all0813、all2736、alr2887基因表達(dá)量均在培養(yǎng)24h達(dá)到最大,敲除體中這3個(gè)基因最大相對(duì)表達(dá)量的出現(xiàn)時(shí)間均有所延遲�！窘Y(jié)論】alr0267基因敲除導(dǎo)致異形胞分化頻率增加,同時(shí)影響異形胞的正常發(fā)育。
【作者單位】： 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院廣東省農(nóng)業(yè)生物蛋白質(zhì)功能與調(diào)控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;華南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 魚腥藻PCC alr基因 異形胞 單交換同源重組 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
【基金】：廣東省自然科學(xué)基金項(xiàng)目(S2013010013184) 公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(201003021) 國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(50977041)
【分類號(hào)】：Q943.2
【正文快照】： 魚腥藻PCC 7120(Anabaenasp.PCC 7120)是一種能固氮的絲狀藍(lán)藻,其在缺氮環(huán)境下,沿著絲體每隔一定數(shù)量的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞即可分化出一個(gè)固氮細(xì)胞,此固氮細(xì)胞被稱作異形胞。當(dāng)魚腥藻PCC 7120被置于缺氮環(huán)境中時(shí),細(xì)胞內(nèi)的α-酮戊二酸開始積累[1-2],即使在加氮環(huán)境下,人為地增加藍(lán)藻細(xì)胞

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：480255