本文關(guān)鍵詞：奶山羊ELOVL6基因啟動(dòng)子的克隆及活性區(qū)域分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：超長(zhǎng)鏈脂肪酸延伸酶6(elongase of very long chain fatty acids 6,ELOVL6)主要催化C12~C16飽和或單不飽和脂肪酸的延伸,是長(zhǎng)鏈脂肪酸延長(zhǎng)反應(yīng)的限速酶。本研究根據(jù)云南黑山羊(Capra hircus)的基因組序列(Gene ID:NW_005100691.1)設(shè)計(jì)引物,以血液DNA為模板,利用PCR技術(shù)擴(kuò)增得到西農(nóng)薩能奶山羊(C.hircus)ELOVL6基因啟動(dòng)子的全長(zhǎng)序列,通過(guò)缺失分析,構(gòu)建了10個(gè)包含ELOVL6啟動(dòng)子不同缺失片段的熒光素酶報(bào)告基因載體,與海腎熒光素酶對(duì)照?qǐng)?bào)告基因載體(p RL-TK)共同轉(zhuǎn)染西農(nóng)薩能奶山羊乳腺上皮細(xì)胞,利用雙熒光素酶系統(tǒng)檢測(cè)不同片段的啟動(dòng)子活性。結(jié)果表明,克隆得到ELOVL6基因啟動(dòng)子全長(zhǎng)序列2 370 bp(包含轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游2 168 bp),其與牛(Bos taurus)、人(Homo sapiens)和鼠(Mus musculus)的基因組序列同源性分別為94%、81%和80%,ELOVL6啟動(dòng)子上無(wú)典型的真核生物啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄元件TATA框。缺失突變研究發(fā)現(xiàn),ELOVL6基因啟動(dòng)子前端存在負(fù)調(diào)控元件,啟動(dòng)子核心區(qū)域位于轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)上游109~40 bp,該序列包含過(guò)氧化酶體增殖物激活受體(peroxisom prolifeator-activated receptor,PPAR)、肝X受體(liver X receptor,LXR)、膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白-1(sterol-regulatory element binding protein-1,SREBP-1)、特異性蛋白1(specificity protein 1,Sp1)及核因子Y(nuclear factor Y,NF-Y)等轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn),本研究為ELOVL6基因啟動(dòng)子的功能研究提供理論依據(jù)。
【作者單位】： 西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院/陜西省農(nóng)業(yè)分子生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】： 超長(zhǎng)鏈脂肪酸延伸酶(ELOVL) 啟動(dòng)子 基因克隆 西農(nóng)薩能奶山羊
【基金】：轉(zhuǎn)基因生物新品種培育項(xiàng)目(No.2014ZX08009-051B) 公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(No.201103038) 陜西省國(guó)際科技合作重點(diǎn)項(xiàng)目計(jì)劃(No.2014KW14-02)
【分類號(hào)】：S827
【正文快照】： 超長(zhǎng)鏈脂肪酸延伸酶6(elongase of very longchain fatty acids 6,ELOVL6)是長(zhǎng)鏈脂肪酸延長(zhǎng)反應(yīng)的限速酶(Green,Olson,2011),能夠催化延長(zhǎng)C12~C16的飽和或單不飽和脂肪酸,對(duì)C18:0和C18:1n-9的脂肪酸合成具有重要作用(Moon et al.,2014;Matsuzaka et al.,2002)。脂肪酸延伸反應(yīng)

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中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 何文s

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