本文關(guān)鍵詞：針刺對(duì)應(yīng)激性高血壓前期大鼠心臟基因表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：在社會(huì)生活中,由于工作和生活環(huán)境中的物理應(yīng)激以及不斷增加的社會(huì)心理應(yīng)激如長(zhǎng)期的工作和生活壓力導(dǎo)致的緊張、焦慮、抑郁情緒變化等刺激作用于機(jī)體,成為誘導(dǎo)血壓升高的重要因素,高血壓發(fā)病率逐年增高。高血壓前期是高血壓病的前驅(qū)階段,此時(shí)患者可能已經(jīng)出現(xiàn)靶器官損傷同時(shí)伴有相關(guān)基因蛋白的改變,越來越多的研究開始認(rèn)識(shí)到在高血壓前期及時(shí)干預(yù)對(duì)逆轉(zhuǎn)高血壓病發(fā)生的重要性和靶器官的重要保護(hù)作用。本實(shí)驗(yàn)以中醫(yī)“治未病”原理為出發(fā)點(diǎn),著眼于針刺對(duì)應(yīng)激性高血壓前期大鼠的降壓和心臟靶器官的保護(hù)效應(yīng)機(jī)制,采用噪聲結(jié)合足底電擊的造模方式制造應(yīng)激性高血壓前期大鼠模型,同時(shí)給予針刺干預(yù),運(yùn)用基因芯片技術(shù)探究針刺對(duì)應(yīng)激性高血壓前期大鼠心臟基因表達(dá)的影響,篩選出相關(guān)基因并進(jìn)行RT-PCR驗(yàn)證,探討這些基因在針刺干預(yù)應(yīng)激性高血壓前期過程中的生物作用機(jī)制。方法：將9周齡雄性Wistar大鼠33只,隨機(jī)分為空白組、模型組、模型+針刺組,每組11只。造模方法：噪聲結(jié)合足底電擊刺激,造模周期：14天。造模同時(shí),針刺組針刺“曲池穴”、“太沖穴”進(jìn)行干預(yù),模型組和空白組每天只做與針刺組相同的抓取刺激。記錄在造模前1天、第3、5、7、9、11、13、15天大鼠的血壓變化,觀察行為改變。第15天量取血壓后取大鼠心肌組織,其中2只大鼠心臟進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,其余9只大鼠心臟組織進(jìn)行基因芯片技術(shù)分析。結(jié)果：1.造模開始后,空白組血壓一直正常；第3天,模型組血壓開始上升120mmHg,至第14天,血壓持續(xù)升高并保持在高血壓前期(120-139mmHg)狀態(tài)(P0.01),出現(xiàn)行為改變,提示造模成功。針刺干預(yù)第5天開始,針刺組血壓低于模型組(P0.05),第15天,模型組已達(dá)到高血壓水平,針刺組血壓低于模型組,與模型組相比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。造模過程中,模型組大鼠血壓持續(xù)上升的同時(shí)出現(xiàn)易激惹、驚叫、撕咬、尿黃、便干、毛發(fā)黃、眼睛充血等狀態(tài)。HE染色結(jié)果也顯示模型組心肌有損傷出現(xiàn),細(xì)胞排列紊亂,部分細(xì)胞核形態(tài)發(fā)生改變,細(xì)胞核變大或溶解,有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),肌細(xì)胞之問有較大空隙排列不緊密。肌纖維散見出血點(diǎn),出血點(diǎn)周圍有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。2.芯片檢測(cè)結(jié)果顯示：模型組和空白組比較：有表達(dá)差異的基因共有390個(gè),其中208個(gè)基因表達(dá)上調(diào),182個(gè)基因表達(dá)下調(diào)；針刺組和模型組比較：有表達(dá)差異的基因有321個(gè),其中138個(gè)基因表達(dá)上調(diào),183個(gè)基因表達(dá)下調(diào)；與空白組比較,模型組、針刺組均發(fā)生表達(dá)變化的基因有146個(gè)。基因功能富集分析顯示：差異基因與化學(xué)反應(yīng)、雌激素反應(yīng)、鉀通道運(yùn)動(dòng)、有機(jī)物反應(yīng)、肌肉反應(yīng)良性調(diào)節(jié)、類固醇合成、應(yīng)激保護(hù)等功能有關(guān)。KEGG通路分析顯示：模型組與空白組之間有表達(dá)差異的基因與93條通路有關(guān),針刺組和模型組之間有表達(dá)差異的基因與78條通路有關(guān)。其中與高血壓密切相關(guān)的信號(hào)通路有PPAR信號(hào)傳導(dǎo)通路、鈣離子信號(hào)通路、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子信號(hào)通路、TGF-beta(轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β)信號(hào)通路、血管平滑肌收縮通路等。3.心肌中,硫氧還蛋白相互作用蛋白(TXNIP)、鈣衛(wèi)蛋白(S100A8/A9)、丙酮酸脫氫酶激酶4(PDK4)在模型組的表達(dá)高于空白組(P0.01),在針刺干預(yù)后又逐漸下降(P0.01),與血壓及心臟損傷密切相關(guān),RT-PCR驗(yàn)證結(jié)果與芯片結(jié)果相一致。結(jié)論：針刺“太沖穴”、“曲池穴”對(duì)于應(yīng)激性高血壓前期大鼠具有明顯的降壓效應(yīng),心肌組織中基因表達(dá)發(fā)生變化,其機(jī)制可能與調(diào)控高血壓相關(guān)基因TXNIP、S100A8/A9、 PDK4 mRNA的表達(dá)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：基因芯片 心臟損傷 應(yīng)激性高血壓前期 針刺 作用機(jī)制
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R245
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 符號(hào)說明9-10
• 綜述一 應(yīng)激性高血壓前期研究進(jìn)展10-28
• 1. 高血壓前期概念的提出10
• 2. 高血壓前期流行病學(xué)研究10-11
• 3. 應(yīng)激性高血壓的發(fā)病機(jī)制研究11-14
• 4. 高血壓前期導(dǎo)致心臟損傷14-16
• 5. 高血壓前期的中醫(yī)研究16-21
• 5.1 高血壓前期的病因病機(jī)認(rèn)識(shí)17-18
• 5.2 高血壓前期的辨證分型18
• 5.3 高血壓前期的干預(yù)18-21
• 參考文獻(xiàn)21-28
• 綜述二 基因芯片技術(shù)在針灸中的應(yīng)用28-37
• 1. 基因芯片技術(shù)概述28
• 2. 基因芯片的種類28-29
• 3. 基因芯片實(shí)驗(yàn)的操作過程29-30
• 4. 心臟損傷相關(guān)基因的研究30-31
• 5. 在針灸作用機(jī)制研究方面的應(yīng)用31-34
• 參考文獻(xiàn)34-37
• 實(shí)驗(yàn)研究37-83
• 前言37-39
• 實(shí)驗(yàn)一 針刺對(duì)應(yīng)激性高血壓前期大鼠的影響39-51
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料39
• 1.2 操作方法39-42
• 1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果42-44
• 1.3.1 各組大鼠實(shí)驗(yàn)前后收縮壓的變化42-43
• 1.3.2 大鼠心肌組織光鏡下觀察43-44
• 1.4 小結(jié)44
• 1.5 討論44-48
• 1.5.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型的制備44-46
• 1.5.2 取穴46-48
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 實(shí)驗(yàn)二 針刺對(duì)應(yīng)激性高血壓前期大鼠心臟基因表達(dá)的影響51-83
• 2.1 實(shí)驗(yàn)器材51
• 2.2 實(shí)驗(yàn)試劑51-53
• 2.3 基因芯片檢測(cè)流程53-57
• 2.4 數(shù)據(jù)分析57-59
• 2.5 高血壓相關(guān)的差異表達(dá)基因的RT-PCR驗(yàn)證59-61
• 2.6 實(shí)驗(yàn)結(jié)果61-78
• 2.6.1 芯片檢測(cè)結(jié)果61-65
• 2.6.2 基因GO功能富集分析結(jié)果65-70
• 2.6.3 KEGG信號(hào)通路分析結(jié)果70-75
• 2.6.4 PCR驗(yàn)證結(jié)果75-78
• 2.7 小結(jié)78
• 2.8 討論78-81
• 參考文獻(xiàn)81-83
• 結(jié)語83-85
• 1. 結(jié)論83
• 2. 不足與展望83-85
• 致謝85-86
• 在學(xué)期間研究成果86-87
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷87

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  本文關(guān)鍵詞：針刺對(duì)應(yīng)激性高血壓前期大鼠心臟基因表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：437835