稻穗是水稻的收獲部位,其形態(tài)發(fā)育與產(chǎn)量密切相關。本研究對日本粳型常規(guī)水稻（Oryza sativa L.）Kitaake進行EMS誘變處理,在M₂代獲得一份小穗異常突變體。經(jīng)連續(xù)多代自交后發(fā)現(xiàn),該突變性狀能夠穩(wěn)定遺傳,暫時將其命名為ossp1。通過農(nóng)藝性狀調(diào)查、生長發(fā)育動態(tài)觀察、外源激素處理、內(nèi)源激素測定、細胞學分析、基因定位、圖位克隆、四引物受阻分子標記、生物信息學分析與qRT-PCR定量分析等研究方法,對控制該突變性狀的基因進行克隆,分析其表達模式。具體研究結(jié)果如下:1.通過對突變體進行表型鑒定發(fā)現(xiàn),相較于野生型KTK,除粒長有所增加外,突變體ossp1的株高、分蘗數(shù)、結(jié)實率、千粒重及有效穗粒數(shù)等主要產(chǎn)量性狀都顯著減少。其發(fā)芽進程滯后,種子活性和花粉育性顯著降低。莖部和穗部的內(nèi)源激素GA、IAA、CTK含量都表現(xiàn)出下降趨勢。突變體ossp1的小穗在幼穗發(fā)育期與野生型并無明顯差異。但在籽粒蠟熟期,突變體的內(nèi)外護穎呈現(xiàn)出明顯的增長變寬,其穎果形態(tài)變得細長,千粒重下降33.1%。細胞學觀察發(fā)現(xiàn)突變體ossp1的護穎細胞與穎殼細胞明顯比野生型增長,細胞結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)明顯硅化,...

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.水稻小穗和花序的形態(tài)結(jié)構(gòu)
    2.花器官發(fā)育模型
        2.1 ABC模型
        2.2 ABCDE模型
        2.3 水稻ABCDE類功能基因
    3.水稻花序發(fā)育
        3.1 水稻花序結(jié)構(gòu)
        3.2 水稻花序發(fā)育過程
    4.水稻小穗發(fā)育
        4.1 水稻小穗結(jié)構(gòu)
        4.2 水稻穗發(fā)育過程
    5.水稻護穎研究進展
    6.水稻小穗發(fā)育研究進展
    7.ASP1 基因研究進展
    8.水稻基因定位和克隆的研究
        8.1 分子標記在水稻研究中的應用
        8.2 構(gòu)建水稻分子遺傳連鎖圖譜
        8.3 水稻基因的定位
        8.4 水稻基因克隆
            8.4.1 基于作物功能蛋白質(zhì)序列的基因克隆
            8.4.2 基于基因表達差異的基因克隆
            8.4.3 基于基因加標簽的基因克隆
            8.4.4 基于基因序列的基因克隆
            8.4.5 基于基因遺傳圖譜的基因克隆
    9.實驗目的及意義
第二章 材料與方法
    1.實驗材料
        1.1 供試材料
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
    2.實驗方法
        2.1 農(nóng)藝性狀調(diào)查
        2.2 生長與發(fā)育動態(tài)觀察
            2.2.1 室內(nèi)發(fā)芽試驗
            2.2.2 種子活力觀察
            2.2.3 根部生長性狀觀察
            2.2.4 相關激素的測定
        2.3 組織細胞學觀察與花粉育性鑒定
        2.4 遺傳分析與群體構(gòu)建
        2.5 突變體ossp1 的基因定位
            2.5.1 遺傳圖譜的構(gòu)建與測序分析
            2.5.2 CTAB法提取水稻基因組DNA
            2.5.3 PCR擴增分析
            2.5.4 瓊脂糖凝膠電泳
            2.5.5 目的片段回收
        2.6 共分離鑒定
        2.7 OsSP1 基因的生物信息學分析
        2.8 OsSP1 的組織特異性表達分析
            2.8.1 Trizol法提取RNA
            2.8.2 RNA純化
            2.8.3 反轉(zhuǎn)錄
            2.8.4 qRT-PCR
第三章 結(jié)果與分析
    1.ossp1 的表型特征與主要農(nóng)藝性狀表現(xiàn)
    2.生長與發(fā)育動態(tài)觀察
        2.1 節(jié)間觀察和分析
        2.2 ossp1 的花器官形態(tài)與花粉育性觀察
        2.3 相關激素的生理生化測定
    3.ossp1 的組織細胞學觀察
    4.ossp1 的遺傳分析與基因定位
    5.候選基因的篩選和測序驗證及生物信息學分析
    6.ossp1 的表達模式分析
        6.1 OsSP1 基因的組織特異性表達分析
        6.2 花發(fā)育相關基因的表達
第四章 討論與結(jié)論
    1.討論
        1.1 OsSP1 編碼一個TPR/TPL轉(zhuǎn)錄輔抑制因子
        1.2 OsSP1 與其它穎花發(fā)育基因、生長素信號通路基因可能存在互作的分子機制
        1.3 OsSP1是ASP1 的新等位基因
    2.展望
參考文獻
致謝



本文編號：4047764