觀賞羽衣甘藍(lán)BoDFR基因的克隆及表達(dá)分析
【文章頁(yè)數(shù)】:7 頁(yè)
【部分圖文】:
圖1 不同葉色羽衣甘藍(lán)試材
花青素提取參考李果等[11]的方法。取0.3g樣品用1%鹽酸甲醇4℃提取24h,12000r·min-1離心15min,取上清液定容至10mL。將樣品分別用25mmol·L-1氯化鉀溶液(pH1.0)和400mmol·L-1醋酸鈉溶液(pH4.5....
圖2 不同試材心葉花青素含量
以羽衣甘藍(lán)葉片cDNA為模板,擴(kuò)增出一段約1000bp的片段(圖3)。將該片段連接pEASY載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌后,經(jīng)測(cè)序獲得該片段完整序列,命名為BoDFR。序列分析結(jié)果顯示,紫葉羽衣甘藍(lán)BoDFR基因編碼區(qū)全長(zhǎng)1158bp(圖3),編碼385個(gè)氨基酸,其蛋白....
圖3 BoDFR擴(kuò)增結(jié)果
通過(guò)Blast對(duì)克隆得到的BoDFR基因編碼的氨基酸序列進(jìn)行比對(duì)分析,結(jié)果表明,羽衣甘藍(lán)DFR蛋白與結(jié)球甘藍(lán)的相似性最高,達(dá)到99.48%;與其他十字花科植物,如大白菜、甘藍(lán)型油菜、芥菜、蘿卜、擬南芥、醉蝶花相似性在72.42%~98.44%;而與其他5種非同科作物的相似性為69....
圖4 BoDFR 蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)
為了研究DFR基因在不同葉色羽衣甘藍(lán)中的表達(dá)情況,提取紫色、粉色、白色3個(gè)不同顏色心葉品系葉片的總RNA,反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,以之為模板,利用熒光定量PCR檢測(cè)BoDFR在不同葉色羽衣甘藍(lán)心葉的表達(dá)模式(圖7)。結(jié)果表明,BoDFR在3個(gè)試材心葉中均有表達(dá),在紫色羽衣甘藍(lán)心....
本文編號(hào):4029302
本文鏈接:http://sikaile.net/kejilunwen/jiyingongcheng/4029302.html
下一篇:沒(méi)有了