本文關(guān)鍵詞：EDS5及其同源基因EDS5-LIKE參與BAK1和BKK1介導(dǎo)的細(xì)胞死亡途徑功能的探究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：在植物適應(yīng)多種復(fù)雜的外界環(huán)境中,LRR-RLKs(富含亮氨酸重復(fù)序列類受體激酶)在感受細(xì)胞外信號(hào)并啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)多種反應(yīng)等方面發(fā)揮著極其重要的作用。擬南芥Somatic Embryogenesis Receptor Kinase(SERK)成員從屬于LRR-RLKs亞家族,成員包括SERK1、SERK2、SERK3/BAK1、SERK4/BKK和SERK5。它們?cè)谟筒怂貎?nèi)酯的信號(hào)傳導(dǎo)、細(xì)胞死亡調(diào)控及病原菌的抵抗等方面發(fā)揮關(guān)鍵作用。BAK1和BKK1的缺失突變體bak1-3 bkk1-1表現(xiàn)出強(qiáng)烈的細(xì)胞死亡表型。即使在無(wú)菌的培養(yǎng)條件下,bak1-3 bkk1-1雙突變體的子葉也出現(xiàn)黃化,并最終導(dǎo)致PR1(病原菌相關(guān)基因)表達(dá)水平升高、活性氧的爆發(fā)以及水楊酸的積累。EDS5屬于MATE-transporter(multidrug and toxin extrusion transporter)家族,很多研究表明其與水楊酸合成相關(guān)。本論文研究目的為探究EDS5及其同源蛋白EDS5-LIKE的功能以及其在BAK1和BKK1介導(dǎo)的細(xì)胞死亡途徑中的作用。首先進(jìn)行了EDS5及其同源蛋白EDS5-LIKE的亞細(xì)胞定位,然后將這兩個(gè)蛋白的編碼基因超表達(dá)到野生型Col-0和C24中,最后將EDS5及其同源基因EDS5-LIKE在bak1-3 bkk1-1的背景下敲除。發(fā)現(xiàn)bak1-3 bkk1-1 eds5中的細(xì)胞死亡表型相對(duì)bak1-3 bkk1-1得到明顯緩解,而bak1-3 bkk1-1 eds5-like中的細(xì)胞死亡表型與bak1-3 bkk1-1沒(méi)有明顯差異。這些結(jié)果表明,EDS5和EDS5-LIKE均定位于葉綠體膜上,且EDS5的功能可能是將在葉綠體中合成的水楊酸運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞質(zhì)中發(fā)揮作用。此外,bak1-3bkk1-1 eds5可以抑制bak1-3bkk1-1的表型,因此EDS5參與到了bak1-3 bkk1-1介導(dǎo)的細(xì)胞死亡途徑中,而EDS5-LIKE可能沒(méi)有參與到此途徑中。
【關(guān)鍵詞】：BRI1-ASSOCIATED RECEPTOR KINASE 1(BAK1) 細(xì)胞死亡 水楊酸 EDS5 EDS5-LIKE 植物免疫
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：Q943.2
【目錄】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-8
• 第一章 前言8-21
• 1.1 油菜素內(nèi)酯(Brassinosteroid，BRs)的發(fā)現(xiàn)，功能和研究進(jìn)展8-9
• 1.1.1 油菜素內(nèi)酯的發(fā)現(xiàn)8
• 1.1.2 油菜素內(nèi)酯對(duì)植物生長(zhǎng)和發(fā)育的影響8-9
• 1.2 植物免疫系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)與研究進(jìn)展9-12
• 1.2.1 擬南芥作為理想的植物病理研究材料的發(fā)展歷史9-10
• 1.2.2 植物免疫系統(tǒng)總括10-11
• 1.2.3 植物免疫系統(tǒng)的兩條防線及超敏反應(yīng)11-12
• 1.3 水楊酸(SA)在植物細(xì)胞免疫中發(fā)揮了核心作用12-14
• 1.3.1 水楊酸在植物免疫系統(tǒng)中的作用12
• 1.3.2 NPR1是水楊酸介導(dǎo)的脅迫反應(yīng)的最主要的調(diào)控因子12-13
• 1.3.3 NPR1的同源蛋白NPR3和NPR4是水楊酸的受體13-14
• 1.4 油菜素內(nèi)酯和水楊酸的相互作用來(lái)調(diào)控植物體的脅迫反應(yīng)14-15
• 1.5 SERKs基因家族在植物生長(zhǎng)發(fā)育和脅迫反應(yīng)中的雙重作用15-19
• 1.5.1 SERKs在植物組織發(fā)生和胚胎發(fā)生中的作用15-16
• 1.5.2 SERKs在脅迫反應(yīng)中作為一個(gè)廣譜的信號(hào)發(fā)揮作用16-17
• 1.5.3 BAK1在生長(zhǎng)發(fā)育和植物免疫中發(fā)揮著雙重作用17-18
• 1.5.4 BAK1和BKK1介導(dǎo)的細(xì)胞死亡18-19
• 1.6 EDS5基因的發(fā)現(xiàn)以及目前在細(xì)胞免疫中作用的研究19-21
• 第二章 實(shí)驗(yàn)材料和方法21-26
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料與植物生長(zhǎng)條件21
• 2.2 實(shí)驗(yàn)中所用到的基因克隆的方法21-22
• 2.2.1 Gateway方法克隆所需要的基因21-22
• 2.2.2 酶切連接方法克隆所需要的基因22
• 2.3 轉(zhuǎn)基因植株的構(gòu)建、篩選和鑒定22-23
• 2.4 基因表達(dá)分析23-25
• 2.5 組織特異性表達(dá)(GUS報(bào)告基因確定基因的表達(dá)部位)25
• 2.6 臺(tái)盼藍(lán)染色25
• 2.7 DAB染色25-26
• 第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析26-47
• 3.1 EDS5及其同源基因EDS5-LIKE功能的預(yù)測(cè)26-32
• 3.1.1 EDS5及其同源基因EDS5-LIKE屬于MATE-transporter (multidrugand toxin extrusion transporter)家族26-27
• 3.1.2 EDS5在植物免疫中作用的探究27-28
• 3.1.3 EDS5及其同源基因EDS5-LIKE所編碼的蛋白序列比對(duì)28-30
• 3.1.4 EDS5及其同源蛋白EDS5-LIKE的組織特異性表達(dá)30-31
• 3.1.5 EDS5及其同源蛋白EDS5-LIKE的亞細(xì)胞定位31-32
• 3.2 EDS5及其同源基因EDS5-LIKE的超表達(dá)32-39
• 3.2.1 EDS5及其同源基因EDS5-LIKE后連FLAG標(biāo)簽超表達(dá)到擬南芥野生型Col-0 中32-34
• 3.2.2 EDS5及其同源基因EDS5-LIKE后連FLAG標(biāo)簽超表達(dá)到雙突bak1-3 bkk1-1 中34-35
• 3.2.3 EDS5基因后連標(biāo)簽與不連標(biāo)簽超表達(dá)到擬南芥野生型C24中35-37
• 3.2.4 EDS5-LIKE后連標(biāo)簽與不連標(biāo)簽超表達(dá)到擬南芥野生型C24中37-39
• 3.3 EDS5及其同源基因EDS5-LIKE的T-DNA插入缺失突變體39-43
• 3.3.1 EDS5及其同源基因EDS5-LIKE與bak1 bkk1雜交的缺失突變體的表型39-41
• 3.3.2 EDS5及其同源基因等雜交突變體的臺(tái)盼藍(lán)染色及DAB染色觀察結(jié)果41-42
• 3.3.3 EDS5及其同源基因EDS5-LIKE等雜交突變體的水楊酸標(biāo)記基因等的表達(dá)42-43
• 3.4 回補(bǔ)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證上述結(jié)果43-47
• 3.4.1 EDS5回補(bǔ)到bak1-3 bkk1-1 eds5三突中的表型結(jié)果與RT-PCR結(jié)果43-44
• 3.4.2 EDS5-LIKE回補(bǔ)到bak1-3 bkk1-1 eds5三突中的表型圖和RT-PCR結(jié)果44-47
• 第四章 討論47-50
• 4.1 植物免疫系統(tǒng)中很多問(wèn)題有待研究47-48
• 4.2 SERKS基因家族的其他方面的功能有待探究48
• 4.3 EDS5及其同源基因在免疫中的作用有待進(jìn)一步探究48-50
• 參考文獻(xiàn)50-56
• 在學(xué)期間的研究成果56-57
• 致謝57

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 趙建新;EDS5及其同源基因EDS5-LIKE參與BAK1和BKK1介導(dǎo)的細(xì)胞死亡途徑功能的探究[D];蘭州大學(xué);2016年

  本文關(guān)鍵詞：EDS5及其同源基因EDS5-LIKE參與BAK1和BKK1介導(dǎo)的細(xì)胞死亡途徑功能的探究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：400367