目的:構(gòu)建APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠并觀察自噬流在阿爾茨海默病中的動態(tài)變化。方法:將CAG-mRFP-e GFP-LC3轉(zhuǎn)基因自噬流模型小鼠與APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因阿爾茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)模型小鼠交配繁殖,對產(chǎn)下的子代進行基因分型鑒定,選出同時含有CAG-mRFP-eGFP-LC3基因和APP/PS1的小鼠為APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠,Morris水迷宮實驗檢測小鼠行為學變化,透射電鏡下觀察自噬體的形成,采用免疫組織化學法檢測老年斑的形成。取3月齡、6月齡、10月齡APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠和同窩同月齡CAG-mRFP-eGFP-LC3單轉(zhuǎn)基因小鼠各6只,斷頭取腦后在熒光顯微鏡下觀察自噬流的變化,用Western blot檢測自噬標志物。結(jié)果:基因分型證實APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠構(gòu)建成功。Morris水迷宮顯示,APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠找到平臺的平均潛伏期和路程均明顯增加,穿越平臺的次數(shù)明顯減少。透射電鏡下觀察,6月齡APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠腦神經(jīng)元內(nèi)出現(xiàn)更多的自噬小泡。免疫組化染色結(jié)果顯示3月齡...

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【學位級別】：碩士

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圖1APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠的基因分型鑒定

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠的鑒定PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠的基因分型篩選雄性的種鼠產(chǎn)下后代，剪鼠尾提取基因組DNA經(jīng)PCR擴增后，同時出現(xiàn)APP，PS1，CAG條帶的即為APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基S1雙轉(zhuǎn)基因小鼠，2、3、5....

圖4透射電鏡觀察6月齡APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠和同窩

a)CAG-mRFP-eGFP-LC3單轉(zhuǎn)基因小鼠腦神經(jīng)元內(nèi)無自噬小體；b)APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠腦神經(jīng)元內(nèi)出現(xiàn)數(shù)量較多的自噬小體（箭頭指向區(qū)域）圖4透射電鏡觀察6月齡APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠和同窩CAG-mRFP-eGFP-LC3單轉(zhuǎn)基....

圖8不同月齡APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)自噬體和自噬溶酶體情況比較

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文2.2.1.4不同月齡APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠腦內(nèi)自噬體和自6月齡APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠腦海馬區(qū)自噬體數(shù)量高于APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠，3月齡APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小數(shù)量低于10月齡。腦....

圖12免疫熒光檢測顯示老年斑和自噬體、自噬溶酶體的共存情況

(a-d)3月齡CAG-mRFP-eGFP-LC3單轉(zhuǎn)基因小鼠(e-h)3月齡APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠（i-l）6月齡CAG-mRFP-eGFP-LC3單轉(zhuǎn)基因小鼠（m-p）6月齡APP/PS1/LC3三轉(zhuǎn)基因小鼠（q-t）10月齡CAG-....

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