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農(nóng)桿菌介導(dǎo)的苜蓿耐鹽SOS多基因遺傳轉(zhuǎn)化研究

發(fā)布時(shí)間:2024-05-16 22:30
  苜蓿(Medicago sativa L.)是全世界分布最廣的一種多年生豆科牧草,也是我國(guó)畜牧業(yè)生產(chǎn)中的重要飼草飼料,具有產(chǎn)量高,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富,氨基酸組成均衡,畜禽均喜食等特性。隨著生態(tài)文明建設(shè)和現(xiàn)代草畜產(chǎn)業(yè)發(fā)展,迫切需求節(jié)水抗旱和耐鹽苜蓿新品種。利用分子育種手段是加快培育苜蓿耐鹽新品種的有效途徑。SOS(Salt Overly Sensitive,SOS)家族基因具有調(diào)控離子平衡作用,已在擬南芥、水稻、煙草和草坪草等植物中驗(yàn)證具有提高耐鹽性功能,但目前應(yīng)用該家族基因進(jìn)行苜蓿耐鹽性改良報(bào)道較少。本研究基于苜蓿高頻再生體系的建立,優(yōu)化了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的SOS家族多基因(SOS2和SOS3)遺傳轉(zhuǎn)化體系,獲得了耐鹽轉(zhuǎn)基因株系,并在室內(nèi)和田間進(jìn)行了耐鹽性鑒定和評(píng)價(jià)。主要結(jié)果如下:1.通過愈傷組織和子葉節(jié)離體培養(yǎng),構(gòu)建了高頻的愈傷組織再生體系和子葉節(jié)再生體系。以“杰克林”、“阿爾岡金”、“金皇后1”、“金皇后2”、“皇后2000”、“柏拉圖”、“三得利”、“甘農(nóng)3號(hào)”、“敖漢”和“隴東”10個(gè)苜蓿品種為研究對(duì)象,對(duì)其愈傷組織誘導(dǎo)分化,不定芽誘導(dǎo)伸長(zhǎng)和生根等影響因素進(jìn)行了系統(tǒng)研究,研究表明“杰克林”...

【文章頁數(shù)】:143 頁

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

圖2-1子葉節(jié)外植體的切取方式??

圖2-1子葉節(jié)外植體的切取方式??

2.1.2.7.1子葉節(jié)外植體的獲得及芽啟動(dòng)??7?d苗齡的“金皇后2”苜蓿子葉節(jié)外植體通過兩種切取方式:①去除頂芽,保留一片子葉和2??mm下胚軸;②去除頂芽,保留兩片子葉的2/3和2?mm下胚軸(圖2-1)。將獲得的子葉節(jié)豎直向下??插入MS或1/2?MS培養(yǎng)基中,光照或暗培....


圖2-2不同培養(yǎng)基培養(yǎng)出的無菌苗??

圖2-2不同培養(yǎng)基培養(yǎng)出的無菌苗??

將己消毒的腎型苜蓿種子擺放在種子萌發(fā)培養(yǎng)基上,接種時(shí)應(yīng)將種子按照形態(tài)學(xué)種臍朝下的??方式,種子在發(fā)芽時(shí)胚根可以受地心引力迅速向培養(yǎng)基中深入生長(zhǎng),并且可以縮短種子的萌發(fā)時(shí)??間(圖2-2)。??基因型是直接影響再生體系及遺傳轉(zhuǎn)化能否成功的關(guān)鍵因素之一。10個(gè)不同苜蓿品種的基因??型....


圖2-4種子發(fā)芽情況??“”“”“”

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圖2-3不同苜蓿品種的種子萌發(fā)率??

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本文編號(hào):3975002

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