發(fā)布時間：2024-04-22 04:54

　　通過CRISPR/Cas系統(tǒng)來構(gòu)建miR-17-92基因簇的雙切載體,研究結(jié)果表明:在miR-17-92基因簇的序列上找到了2個PAM(TGG和GGG)位點,從而得到了2個原間隔序列,設(shè)計合成基因簇雙鏈crRNA;合成該片段并將其插入到p X260載體,使得在同一個載體上雖然只有一個g-RNA,但能夠同時切割兩個不同的靶位點;將該載體轉(zhuǎn)染NIH3T3細(xì)胞驗證切割效率,PCR結(jié)果和測序結(jié)果顯示,所構(gòu)建的CRISPR系統(tǒng)可以對基因片段進(jìn)行有效切割。

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1材料與方法
    1.1 crRNA序列的設(shè)計
    1.2質(zhì)粒載體的構(gòu)建
    1.3 miR-17-92基因簇雙切載體切割效率檢測
2結(jié)果與分析
    2.1 crRNA序列的設(shè)計
    2.2 CRISPR/Cas系統(tǒng)miR-17-92基因簇雙切載體的構(gòu)建
    2.3 miR-17-92基因簇雙切載體的檢測
        2.3.1 PCR檢測
        2.3.2灰度分析切割效率
        2.3.3測序分析
3結(jié)論與討論



本文編號：3961957