矮牽牛(Petunia hybrida Var.Mitchel diploid)為茄科碧冬茄屬,由于花色豐富、花期長、栽培容易,是園林應(yīng)用中重要的觀賞植物。矮牽牛分枝發(fā)育及抗逆性均是目前研究的熱點(diǎn)。本研究以矮牽牛為試驗(yàn)材料,克隆了矮牽牛糖基轉(zhuǎn)移酶PhUGT74和PhUGT74E2基因,對其序列進(jìn)行了生物信息學(xué)分析,并利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR對PhUGT74E1、PhUGT74E2基因在不同組織、以及干旱及鹽脅迫處理下的表達(dá)進(jìn)行了分析;構(gòu)建了 PhUGT74E1、PhUGT74E2過表達(dá)載體以及PhUGT74E2啟動(dòng)子(pPhUGT74E2)融合GUS的表達(dá)載體,侵染擬南芥獲得35S::PhUGT74E2過表達(dá)轉(zhuǎn)基因植株。主要結(jié)果如下:(1)克隆獲得矮牽牛糖基轉(zhuǎn)移酶PhUGT74E1、PhUGT74E2基因。PhUGT74E1含有一個(gè)1401 bp的開放閱讀框,編碼466個(gè)氨基酸。該蛋白分子量和等電點(diǎn)分別為52.73 kDa和5.42。推測其蛋白分子式為C2374H3715N609O700S23,進(jìn)化樹分析矮牽牛UGT74E1蛋白與馬鈴薯UGT74E1蛋白親緣關(guān)系最近;PhUGT74E2含...

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 抗旱、耐鹽研究進(jìn)展
        1.1.1 抗旱研究進(jìn)展
        1.1.2 耐鹽研究進(jìn)展
    1.2 分枝發(fā)育研究進(jìn)展
        1.2.1 分枝的類型
        1.2.2 影響分枝的因素
    1.3 生長素糖基轉(zhuǎn)移酶研究進(jìn)展
    1.4 國內(nèi)外矮牽牛分枝發(fā)育的研究進(jìn)展
    1.5 UGT74E1、UGT74E2基因的研究進(jìn)展
第二章 引言
    2.1 研究目的與意義
    2.2 研究內(nèi)容
    2.3 技術(shù)路線
第三章 材料與方法
    3.1 材料
        3.1.1 試驗(yàn)材料及菌株、質(zhì)粒和感受態(tài)
    3.2 試驗(yàn)儀器與試劑
        3.2.1 試驗(yàn)儀器
        3.2.2 試驗(yàn)試劑
        3.2.3 常用溶液配方
        3.2.4 根癌農(nóng)桿菌ASE感受態(tài)制作
        3.2.5 本試驗(yàn)引物
    3.3 試驗(yàn)方法
        3.3.1 PhUGT74E1、PhUGT74E2基因的克隆
        3.3.2 PhUGT74E1、PhUGT74E2基因以及啟動(dòng)子的生物信息學(xué)分析
        3.3.3 PhUGT74E1、PhUGT74E2基因的表達(dá)分析
        3.3.4 PhUGT74E1基因過表達(dá)載體的構(gòu)建
        3.3.5 PhUGT74E2基因過表達(dá)載體的構(gòu)建
        3.3.6 PhUGT74E2基因融合GUS表達(dá)載體的構(gòu)建
        3.3.7 擬南芥花序浸染與陽性植株鑒定
第四章 結(jié)果與分析
    4.1 PhUGT74E1基因的克隆與生物信息學(xué)分析
    4.2 PhUGT74E2基因的克隆與生物信息學(xué)分析
    4.3 PhUGT74E2基因的啟動(dòng)子克隆與生物信息學(xué)分析
    4.4 PhUGT74E1、PhUGT74E2基因的表達(dá)分析
        4.4.1 PhUGT74E1基因的特異性表達(dá)分析
        4.4.2 PhUGT74E2基因的特異性表達(dá)分析
        4.4.3 干旱及鹽脅迫下PhUGT74E2的表達(dá)量分析
    4.5 PhUGT74E1基因過表達(dá)載體的構(gòu)建
    4.6 PhUGT74E2基因過表達(dá)載體的構(gòu)建
    4.7 PhUGT74E2基因融合GUS載體的構(gòu)建
第五章 討論
第六章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介



本文編號(hào)：3948796