【目的】從鹽地堿蓬(Suaeda salsa L.)中克隆2個(gè)DREB1/CBF,分析其序列特征、編碼蛋白的亞細(xì)胞定位和轉(zhuǎn)錄激活活性,以及在非生物脅迫下的表達(dá)模式,為進(jìn)一步研究鹽地堿蓬的抗逆機(jī)制提供依據(jù)�！痉椒ā坷猛纯寺》ǐ@得鹽地堿蓬2個(gè)DREB1/CBF片段,采用RACE技術(shù)克隆獲得c DNA全長序列,分別命名為Ss CBF1和Ss CBF2。運(yùn)用生物信息學(xué)軟件對(duì)2個(gè)Ss CBF及其編碼蛋白進(jìn)行分析,并將它們分別與GFP融合構(gòu)建植物表達(dá)載體,通過基因槍轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入洋蔥表皮細(xì)胞進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá),觀察它們編碼蛋白的亞細(xì)胞定位。利用酵母單雜交系統(tǒng)研究2個(gè)Ss CBF與DRE/CRT順式作用元件的結(jié)合特異性和轉(zhuǎn)錄激活活性。采用Real time-PCR研究2個(gè)Ss CBF在低溫、Na Cl、PEG以及ABA處理下的表達(dá)模式�！窘Y(jié)果】Ss CBF1編碼一個(gè)225個(gè)氨基酸的蛋白,預(yù)測分子量為25.4 k D,理論等電點(diǎn)為4.84。Ss CBF2編碼一個(gè)由260個(gè)氨基酸組成的蛋白,預(yù)測分子量為28.6 k D,理論等電點(diǎn)為5.05。Ss CBF1和Ss CBF2均含有1個(gè)典型的AP2/ERF保守結(jié)構(gòu)...

【文章頁數(shù)】：12 頁

【文章目錄】：
0 引言
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 Ss CBF1和Ss CBF2片段的同源克隆
    1.3 Ss CBF1和Ss CBF2的c DNA全長序列的獲得
    1.4 Ss CBF1和Ss CBF2的生物信息學(xué)分析
    1.5 Ss CBF1和Ss CBF2的亞細(xì)胞定位
    1.6 酵母單雜交
    1.7 熒光定量PCR分析
2 結(jié)果
    2.1 鹽地堿蓬Ss CBF1和Ss CBF2的克隆與結(jié)構(gòu)分析
    2.2 鹽地堿蓬Ss CBF1、Ss CBF2蛋白序列同源性和系統(tǒng)進(jìn)化分析
    2.3 Ss CBF1和Ss CBF2的亞細(xì)胞定位
    2.4 Ss CFB1和Ss CFB2在酵母中的功能驗(yàn)證
    2.5 Ss CBF1和Ss CBF2在鹽地堿蓬中響應(yīng)非生物脅迫的表達(dá)特性分析
3 討論
4 結(jié)論



本文編號(hào)：3926928