植物細(xì)胞膜脂的不飽和度主要由脂肪酸去飽和酶(Fatty acid desaturases,FADs)決定,它們與植物抵抗低溫和高鹽等逆境脅迫密切相關(guān)。沙冬青(Ammopiptanthus mongolicus)是中亞荒漠區(qū)唯一的常綠旱生闊葉植物,具有很強(qiáng)的耐寒、耐旱和耐鹽堿等耐逆性能。本研究從蒙古沙冬青(本文統(tǒng)稱為沙冬青)中克隆到兩個油酸去飽和酶基因AmFAD2-1和AmFAD2-2,并對其編碼蛋白的結(jié)構(gòu)特征、在非生物脅迫下的表達(dá)變化及其在抵抗逆境脅迫中的功能進(jìn)行了分析,獲得如下主要研究結(jié)果:(1)利用RT-PCR和PCR方法擴(kuò)增到AmFAD2-1和AmFAD2-2的編碼區(qū)cDNA和gDNA片段。二者編碼區(qū)cDNA和gDNA的長度分別均為1149和1152 bp,在gDNA編碼區(qū)內(nèi)均無內(nèi)含子。(2)AmFAD2-1和AmFAD2-2的編碼蛋白分別由382和383個氨基酸殘基組成,二者都含有FAD家族酶活性所必須的保守組氨酸簇HXXXH、HXXHH和HXXHH,在蛋白的C端區(qū)域均含有一個內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位信號(YNNKL)。(3)利用RT-qPCR分析表明,AmFAD2-1和AmFAD2-2不同...

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１植物中不飽和脂肪酸的合成途徑Ｍ??Ｆｉｇ．ｌ?Ｔｈｅ?ｐａｔｈｗａｙ?ｓｃｈｅｍｅ?ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ?ｏｆ?ｕｎｓａｔｕｒａｔｅｄ?ｆａｔｔｙ?ａｃｉｄｓ?ｉｎ?ｐｌａｎｔｓ??

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圖２?ＦＡＤ２的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)模式圖［５１］??Ｆｉｇ．２?Ｍｏｄｅｌ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｐｒｏｐｏｓｅｄ?ｔｏｐｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＦＡＤ２??

７］。ＦＡＤ２分子的Ｎ端第一個疏??水跨膜區(qū)作為其Ｎ端信號肽，可被信號識別顆粒ＳＲＰ?（ｓｉｇｎａｌ?ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ?ｐａｒｔｉｃｌｅ）??識別與結(jié)合，然后在ＳＲＰ引導(dǎo)下到達(dá)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜并通過Ｎ端信號肽插入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜中，??其翻譯完成的蛋白分子的Ｎ端位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的胞質(zhì)一側(cè)［４８....

圖４沙冬青ＲＮＡ檢測圖譜（部分樣品）??Ｆｉｇ．４?Ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＲＮＡｓ?ｆｒｏｍ?Ａ．?ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｓ?（ｐａｒｔｉａｌ?ｓａｍｐｌｅｓ）??

＾?蒙古沙冬青脂肪酸去飽和酶基因的克隆與功能分析???３結(jié)果與分析??３．１沙冬青總ＲＮＡ的提取與檢測??為了進(jìn)行基因克隆和表達(dá)分析，提取了沙冬青各器官樣品中的ＲＮＡ并進(jìn)行純??化，將殘留的ｇＤＮＡ去除。取純化后的ＲＮＡ樣品進(jìn)行電泳檢測，結(jié)果如圖４所示。??所提ＲＮＡ樣品的２８Ｓ....

圖５?基因擴(kuò)增和菌落ＰＣＲ檢測圖譜??Ｆｉｇ．?５?Ｔｈｅ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｃｏｌｏｎｙ?ＰＣＲ?ｐａｔｔｅｒｎｓ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＡｍＦＡＤ２－ｌ?ｇｅｎｅ??

分樣品）??Ｆｉｇ．４?Ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＲＮＡｓ?ｆｒｏｍ?Ａ．?ｍｏｎｇｏｌｉｃｕｓ?（ｐａｒｔｉａｌ?ｓａｍｐｌｅｓ）??３．２?基因的克隆與功能分析??３．２．１?編碼區(qū)克隆與內(nèi)含子分析??本實(shí)驗(yàn)室在前期通過轉(zhuǎn)錄組測序從沙冬青中獲得２個的ｃＤＮＡ序列....

本文編號：3915361