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MGST1基因調(diào)控雞胚肝細(xì)胞的分子機(jī)制研究

發(fā)布時間:2024-02-23 19:26
  過氧化物酶(Peroxidase,POD)、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)和谷胱甘肽過氧化酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)形成了第一道抗氧化防御線,這道防御線共同發(fā)揮作用來抵御活性氧對機(jī)體造成的損傷。在雞胚發(fā)育的過程中,這些酶從休眠態(tài)轉(zhuǎn)化為激活態(tài),為雞胚的正常生長發(fā)育提供保障。在不同孵化階段,不同組織器官內(nèi)的活性也存在較大差異。本研究基于課題組前期篩選出的調(diào)控抗氧化酶活性的關(guān)鍵基因微粒體谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶1(Microsomal glutathione transferase 1,MGST1),對目的基因進(jìn)行RNA干擾,通過轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)鑒定干擾組(GR)和空白組(KB)的差異表達(dá)基因,以期找出MGST1調(diào)控抗氧化酶活性的分子機(jī)制。試驗(yàn)結(jié)果如下(1)雞胚原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)條件的優(yōu)化:選擇將孵化至12 d-20 d的雞胚蛋作為試驗(yàn)原材料,從雞胚胚齡的選擇、胰蛋白酶消化液的濃度及消化時間、胎牛血清類型及血清濃度、細(xì)胞生長因子等幾個方面對原代培養(yǎng)雞胚肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞的分離和培養(yǎng)條件進(jìn)行摸索,最后選取雞胚胚齡為16天、胰蛋白酶消化液濃度...

【文章頁數(shù)】:74 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1RNAi的啟動階段

圖1.1RNAi的啟動階段

合肥工業(yè)大學(xué)專業(yè)碩士研究生學(xué)位論文的dsRNA等。RNAi的作用現(xiàn)象很普遍,要有以下三個階段。不同來源的雙鏈RNA被RNA核酸酶與雙小為21~23個堿基對的小RNA片段(siR有3'羥基末端和5'磷酸基團(tuán)的雙鏈形式,在


圖1.2RNAi的效應(yīng)階段Fig1.2EffectphaseofRNAi

圖1.2RNAi的效應(yīng)階段Fig1.2EffectphaseofRNAi

圖1.1RNAi的啟動階段Fig1.1InitiationphaseofRNAi初始階段,由RNA核酸酶裂解產(chǎn)生的siR解鏈。然后,在siRNA反義鏈的指導(dǎo)下,地切割RNA,導(dǎo)致RNA降解,從而達(dá)到抑


圖1.3RNAi的擴(kuò)增階段

圖1.3RNAi的擴(kuò)增階段

圖1.3RNAi的擴(kuò)增階段Fig1.3AmplificationphaseofRNAi分廣泛,在眾多領(lǐng)域有著重要應(yīng)用。主要包療領(lǐng)域中的應(yīng)用、在整形外科領(lǐng)域的應(yīng)用前的治療、腫瘤病的治療、在植物學(xué)中的應(yīng)酶酶(GST)主要分布在胞漿中,在線粒體、23-29KDa之....


圖2.1雞胚原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞

圖2.1雞胚原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞

d胚齡的雞胚五枚,按2.3.1中方法分離培養(yǎng)雞胚原代肝實(shí)分裝于6孔板中,將其置于溫度為37℃、二氧化碳濃度為養(yǎng)。正常換液,分別于24、48、72、96h后觀察其細(xì)胞生代細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果和培養(yǎng)的過程中,由于肝臟的無定形物質(zhì)比較多,培養(yǎng)過免沉積從而影響細(xì)胞形態(tài)。分離....



本文編號:3907851

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