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可控表達(dá)pGH轉(zhuǎn)基因小鼠制備及其功能研究

發(fā)布時(shí)間:2024-02-21 15:45
  作為一個(gè)誘導(dǎo)基因表達(dá)調(diào)控系統(tǒng),四環(huán)素(tetracycline,Tet)調(diào)控系統(tǒng)在基因工程中已開(kāi)始應(yīng)用于復(fù)雜的生物發(fā)生反應(yīng)、機(jī)體的疾病及行為等。它已成為研究某一基因功能的有效工具,尤其在轉(zhuǎn)基因小鼠的基因功能上,得到了廣泛的應(yīng)用。生長(zhǎng)激素(growth hormone,GH)在不同物種中均具有促進(jìn)性成熟,提高瘦肉率,改善飼料轉(zhuǎn)化率等優(yōu)點(diǎn),但也存在副作用,在轉(zhuǎn)生長(zhǎng)激素基因的動(dòng)物上尤為明顯。這可能由于轉(zhuǎn)GH基因動(dòng)物,都是全身過(guò)表達(dá)GH基因,而且外源GH基因從胚胎期到成年都持續(xù)發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng),其機(jī)體發(fā)育的異常很可能和GH在全身多個(gè)組織器官中的自分泌異常有關(guān)。在Tet調(diào)控系統(tǒng)中,誘導(dǎo)底物四環(huán)素的濃度與外源基因表達(dá)水平在一定范圍內(nèi)呈正相關(guān),因此,可以通過(guò)控制四環(huán)素及其衍生物強(qiáng)力霉素(doxycycline,DOX)的有無(wú)、濃度高低來(lái)調(diào)控所導(dǎo)入的外源基因表達(dá)水平,進(jìn)而認(rèn)識(shí)所導(dǎo)入基因在不同水平及不同生長(zhǎng)階段的表達(dá),了解其在動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育中作用,進(jìn)一步深入研究GH生物學(xué)功能。本研究采用分子生物學(xué)方法,構(gòu)建了豬生長(zhǎng)激素(porcine growth hormone,pGH)真核細(xì)胞可誘導(dǎo)表達(dá)載體,采用陽(yáng)離子...

【文章頁(yè)數(shù)】:139 頁(yè)

【部分圖文】:

圖1-1?Tet調(diào)控系統(tǒng)(維基Cl科)??Figure?1-1?Tet?regulatory?expression?system?(From?vikipedia)??

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均是可逆的。四環(huán)素系統(tǒng)對(duì)表達(dá)有很嚴(yán)格的控制,特異性好,而ER系統(tǒng)有??時(shí)會(huì)有滲漏現(xiàn)象[2()]。Tet調(diào)控系統(tǒng)是最常用的誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng),可用f對(duì)真核細(xì)胞屮物學(xué)??的研究,被廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因動(dòng)物中基因表達(dá)調(diào)控的研究。實(shí)I.作原理如圖1-1所示。??OM?O?〇H?〇?Q?.,???'....


圖1-2?Tet-off系統(tǒng)工作原理示意圖(寶生物。逃邢薰睿?Tet-off基因表達(dá)系統(tǒng)用戶于冊(cè))??Fiure?1-2?Schematic?diaram?of?workinrincile?of?Tet-off?sstem??

圖1-2?Tet-off系統(tǒng)工作原理示意圖(寶生物。逃邢薰睿?Tet-off基因表達(dá)系統(tǒng)用戶于冊(cè))??Fiure?1-2?Schematic?diaram?of?workinrincile?of?Tet-off?sstem??

和TRE兩部分組成,TRE—旦和四環(huán)素反式作用因子進(jìn)行融合,就會(huì)激活啟動(dòng)子的下??游基因或相關(guān)基因的表達(dá)。??如圖1-2所示,在Tet-off調(diào)控系統(tǒng)中,如果外界存在四環(huán)素及其衍生物,TRE調(diào)控??的相關(guān)基因表達(dá)就會(huì)受到抑制,四環(huán)紊及;U:衍生物會(huì)和四環(huán)素反式作用因子結(jié)合,這樣?....


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圖1-31^-〇11系統(tǒng)工作原理示意圖(寶生物。逃邢薰荆保蓿枺;虮磉_(dá)系統(tǒng)用戶亍冊(cè))??Figure?1-3?Schematic?diagram?of?working?principle?of?Tet-on?system??

和TRE兩部分組成,TRE—旦和四環(huán)素反式作用因子進(jìn)行融合,就會(huì)激活啟動(dòng)子的下??游基因或相關(guān)基因的表達(dá)。??如圖1-2所示,在Tet-off調(diào)控系統(tǒng)中,如果外界存在四環(huán)素及其衍生物,TRE調(diào)控??的相關(guān)基因表達(dá)就會(huì)受到抑制,四環(huán)紊及;U:衍生物會(huì)和四環(huán)素反式作用因子結(jié)合,這樣?....


圖1-4/基因簇的組成和表達(dá)產(chǎn)物(:+:松艷“生長(zhǎng)素基因表達(dá)的調(diào)控”)??

圖1-4/基因簇的組成和表達(dá)產(chǎn)物(:+:松艷“生長(zhǎng)素基因表達(dá)的調(diào)控”)??

Figure?1-4?The?composition?of?hGH?gene?cluster?and?expression??(From?regulation?of?gene?expression?of?auxin,?Wang?songyan)??如圖1-4所示,2個(gè)G//基因和....



本文編號(hào):3905633

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