珙桐(Davidia involucrata Baill.)是珙桐科珙桐屬落葉喬木,第三紀(jì)古熱帶孑遺物種,屬于國家I級保護(hù)植物。珙桐有性生殖力弱是限制其自然更新的主要原因,其種子休眠期長,種子敗育情況嚴(yán)重,群落的自然更新存在困難。研究珙桐的種子繁殖規(guī)律,提高珙桐自然繁殖能力,對保護(hù)和利用這一珍貴的物種資源非常重要。為研究珙桐種子發(fā)育的分子機(jī)制,本課題組前期完成了珙桐種子轉(zhuǎn)錄組分析,篩選到1個(gè)編號為c37849.graph_c0的轉(zhuǎn)錄本在種子發(fā)育過程中持續(xù)高量表達(dá),而在發(fā)育異常的種子中表達(dá)量顯著降低。本研究克隆了該轉(zhuǎn)錄本的全長序列,確定其編碼一個(gè)CCCH型鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子,命名為DiZF-CCCH1。分析該基因的表達(dá)模式,確定其在珙桐種子中優(yōu)勢表達(dá)。利用遺傳轉(zhuǎn)化分別將目標(biāo)基因在擬南芥和煙草中超量表達(dá),觀測其對植物生長發(fā)育的影響,驗(yàn)證目標(biāo)基因的生物學(xué)功能。本研究主要得到以下結(jié)果:1.從珙桐中克隆到一個(gè)編碼CCCH型鋅指蛋白轉(zhuǎn)錄因子的基因DiZF-CCCH1,該基因的CDS序列長度為711 bp,無內(nèi)含子,編碼236個(gè)氨基酸,目標(biāo)基因編碼的蛋白是植物特有的RR-TZF型鋅...

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１總ＲＮＡ的提取??Ｆｉｇ．?２．１?Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ??

碩士畢業(yè)論文?哄桐Ｄ；＇ｚｆ－ｃｒｃｗ基因的功能研宂??表２．６?ｑＰＣＲ反應(yīng)體系???Ｔａｂｌｅ?２．６?ｑＰＣＲ?ｒｅａｃｔｉｏｎ?ｓｙｓｔｅｍ???試劑?體積??ＳＹＢＲ?Ｇｒｅｅｎ?Ｍａｓｔｅｒ?Ｍｉｘ?５?（ｉＬ??Ｆｏｒｗａｒｄ?Ｐｒｉｍｅｒ?１?｜ｉＬ??Ｒｅｖｅｒ....

圖２．２Ｄ／ＺＦ－ＣＣＣ７／７基因克隆??Ｆｉｇ．?２．２?Ｃｌｏｎｉｎｇ?ｏｆ?ＤｉＺＦ－ＣＣＣＨｌ?ｇｅｎｅ??

碩士畢業(yè)論文?珙桐Ｄ／ＺＦ－ＣＣＣＴ７基因的功能研宄??有內(nèi)含子，將其命名為Ａ‘ｚＦ－ｃｒａ／７。??ｍｕ?ｃｃｃ／ｎ??／Ｍｆｈｎ?１１１１１１１丨丨＂丨１丨丨｜＂丨丨丨丨■ｆ＿ｉ＿＿１１１１１丨??Ｐｉ＇?－??Ｌ－．“，．．?ｊ?續(xù)??圖２．２Ｄ／ＺＦ－ＣＣＣ７／７基因克隆....

圖２．７?ＤｉＺＦ－ＣＣＣＨｌ蛋白的疏水性分析??Ｆｉｇ．?２．７?Ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＤｉＺＦ－ＣＣＣＨｌ??

碩士畢業(yè)論文?哄桐０／ＺＦ－ＣＣＣＷ／基因的功能研宄??Ｎａｍｅ?Ｌｅｎ?ｃＴＰ?ｍＴＰ?ＳＰ?ｏｔｈｅｒ?Ｌｏｃ?ＲＣ??Ｓｅｑｕｅｎｃｅ?７１１?０．?１３４?０．０１０?０．５０２?０．２３６?Ｓ?４??ｃｕｔｏｆｆ?０．０００?０．０００?０．０００?０．０００??圖２．....

圖３．１載體構(gòu)建流程簡圖??

碩士畢業(yè)論文?珙桐Ｄ／ＺＦ－ＣＣＣＴ／基因的功能研宄??ＢａｍＵｌ?Ｓａｄ?ＢａｍＵｌ??ＩＩ??□?ｉ…?１——料、，１?□??ＲＢ?ＮＰ７Ｈ?３５Ｓ?ＧＵＳ?ＮＯＳ?ＬＢ??ＤｉＺＦ－ＣＣＣＨＪ｛ｉｎ?ｂｐ）?ｐＢＩ１２１?（１４７５８?ｂｐ）??ｙ???ｙ??ｉ??ｏ——ｉ....

本文編號：3903632