目的:Wilms瘤是一種實質(zhì)性腫瘤多發(fā)于兒童,治療方法通常為手術(shù)、化療、放療的聯(lián)合治療,通常情況下預后良好。然而,該腫瘤在經(jīng)過一期治療后會有10-15%的患者發(fā)生復發(fā)和轉(zhuǎn)移,且出現(xiàn)復發(fā)和轉(zhuǎn)移的患者中有將近30%的患者最終死亡。該病的致病機制尚不清楚。許多臨床案例指出在Wilms瘤中能夠檢測到大量的Mutant p53,且有報道指出Mutant p53可以與Smad結(jié)合抑制p63進而促進TGFβ誘導的腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移。它還可以與其下游基因MLL1、MLL2相互作用促進腫瘤的生長,該機制為Gain-of-function,還可通過甲羥戊酸途徑影響乳腺癌的進展,這可能預示著Mutant p53可能與Wilms瘤有關(guān)。在本研究中,我們旨在探討Mutant p53及其下游基因?qū)ilms瘤發(fā)展轉(zhuǎn)移的影響。方法:(1)選取Wi T49細胞作為Wilms瘤的細胞模型,常規(guī)培養(yǎng)與5%CO2培養(yǎng)箱中,每2天換一次液。通過細胞轉(zhuǎn)染實驗獲得shegfp和shtp53的穩(wěn)轉(zhuǎn)株。其中shegfp為陰性對照組,shtp53為實驗組。(2)提取Wi T49細胞的RNA進行QPCR實驗檢測tp53以及其相關(guān)靶基因的基因...

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1在Wilms瘤中,Mutantp53不能通過Gain-of-functiong、甲羥戊酸途徑以及tp53/SmadComplex影響腫瘤的進展

大連醫(yī)科大學碩士學位論文27c.圖2RNA-SEQ實驗篩選出的基因確實隨Mutantp53的敲低而下調(diào)。a.通過RNA-SEQ篩選出隨Mutantp53下調(diào)的18個基因b.通過QPCR實驗檢測這18個基因的基因表達情況。c.通過QPCR實驗檢測shbche穩(wěn)轉(zhuǎn)株基因表達的情況。

圖2RNA-SEQ實驗篩選出的基因確實隨

大連醫(yī)科大學碩士學位論文283.tp53和Bche對Wilms瘤的增殖能力無明顯影響WiT49細胞融合率達到70%時通過MTT實驗對tp53和bche對Wilms瘤增殖能力的影響進行驗證并以每孔5000個細胞種植到96孔板中，分別測量24h、48h、72h、96h在570nm下的....

圖3tp53和Bche會明顯影響Wilms瘤

大連醫(yī)科大學碩士學位論文29shegfpshtp53圖4Bche對Wilms瘤的遷移能力有明顯影響，Mutantp53對Wilms瘤的遷移能力無明顯作用。a.通過Woundhealingassay檢測Bche對Wilms瘤遷移能力的影響。（n=5）b.通過Woundhealing....

圖5:bche不能明顯影響Wilms瘤的細胞a.通過平板細胞克隆實驗檢測Bche對W

大連醫(yī)科大學碩士學位論文29shegfpshtp53圖4Bche對Wilms瘤的遷移能力有明顯影響，Mutantp53對Wilms瘤的遷移能力無明顯作用。a.通過Woundhealingassay檢測Bche對Wilms瘤遷移能力的影響。（n=5）b.通過Woundhealing....

本文編號：3902743