目的:Wilms瘤是一種實(shí)質(zhì)性腫瘤多發(fā)于兒童,治療方法通常為手術(shù)、化療、放療的聯(lián)合治療,通常情況下預(yù)后良好。然而,該腫瘤在經(jīng)過(guò)一期治療后會(huì)有10-15%的患者發(fā)生復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移,且出現(xiàn)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的患者中有將近30%的患者最終死亡。該病的致病機(jī)制尚不清楚。許多臨床案例指出在Wilms瘤中能夠檢測(cè)到大量的Mutant p53,且有報(bào)道指出Mutant p53可以與Smad結(jié)合抑制p63進(jìn)而促進(jìn)TGFβ誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。它還可以與其下游基因MLL1、MLL2相互作用促進(jìn)腫瘤的生長(zhǎng),該機(jī)制為Gain-of-function,還可通過(guò)甲羥戊酸途徑影響乳腺癌的進(jìn)展,這可能預(yù)示著Mutant p53可能與Wilms瘤有關(guān)。在本研究中,我們旨在探討Mutant p53及其下游基因?qū)ilms瘤發(fā)展轉(zhuǎn)移的影響。方法:(1)選取Wi T49細(xì)胞作為Wilms瘤的細(xì)胞模型,常規(guī)培養(yǎng)與5%CO2培養(yǎng)箱中,每2天換一次液。通過(guò)細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)獲得shegfp和shtp53的穩(wěn)轉(zhuǎn)株。其中shegfp為陰性對(duì)照組,shtp53為實(shí)驗(yàn)組。(2)提取Wi T49細(xì)胞的RNA進(jìn)行QPCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)tp53以及其相關(guān)靶基因的基因...

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1在Wilms瘤中,Mutantp53不能通過(guò)Gain-of-functiong、甲羥戊酸途徑以及tp53/SmadComplex影響腫瘤的進(jìn)展

大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文27c.圖2RNA-SEQ實(shí)驗(yàn)篩選出的基因確實(shí)隨Mutantp53的敲低而下調(diào)。a.通過(guò)RNA-SEQ篩選出隨Mutantp53下調(diào)的18個(gè)基因b.通過(guò)QPCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)這18個(gè)基因的基因表達(dá)情況。c.通過(guò)QPCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)shbche穩(wěn)轉(zhuǎn)株基因表達(dá)的情況。

圖2RNA-SEQ實(shí)驗(yàn)篩選出的基因確實(shí)隨

大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文283.tp53和Bche對(duì)Wilms瘤的增殖能力無(wú)明顯影響WiT49細(xì)胞融合率達(dá)到70%時(shí)通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)對(duì)tp53和bche對(duì)Wilms瘤增殖能力的影響進(jìn)行驗(yàn)證并以每孔5000個(gè)細(xì)胞種植到96孔板中，分別測(cè)量24h、48h、72h、96h在570nm下的....

圖3tp53和Bche會(huì)明顯影響Wilms瘤

大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文29shegfpshtp53圖4Bche對(duì)Wilms瘤的遷移能力有明顯影響，Mutantp53對(duì)Wilms瘤的遷移能力無(wú)明顯作用。a.通過(guò)Woundhealingassay檢測(cè)Bche對(duì)Wilms瘤遷移能力的影響。（n=5）b.通過(guò)Woundhealing....

圖5:bche不能明顯影響Wilms瘤的細(xì)胞a.通過(guò)平板細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè)Bche對(duì)W

大連醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文29shegfpshtp53圖4Bche對(duì)Wilms瘤的遷移能力有明顯影響，Mutantp53對(duì)Wilms瘤的遷移能力無(wú)明顯作用。a.通過(guò)Woundhealingassay檢測(cè)Bche對(duì)Wilms瘤遷移能力的影響。（n=5）b.通過(guò)Woundhealing....

本文編號(hào)：3902743