目的探究miR-425-5p靶向ZNF423基因通過Notch信號通路對胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響和機制。方法 qRTPCR和Western blot檢測人胃上皮細(xì)胞GES-1和3種胃癌細(xì)胞(AGS、SGC-7901和BGC-823)中miR-425-5p和ZNF423的表達(dá)水平。以SGC-7901細(xì)胞為研究對象,構(gòu)建抑制miR-425-5p表達(dá)的細(xì)胞株,qRT-PCR檢測miR-425-5p的表達(dá)水平,Transwell實驗檢測細(xì)胞的遷移和侵襲能力,Western blot檢測遷移侵襲和Notch信號通路相關(guān)蛋白的表達(dá)水平。雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灪蚖estern blot驗證miR-425-5p和ZNF423的靶向調(diào)控關(guān)系。結(jié)果與GES-1細(xì)胞相比,3種胃癌細(xì)胞中miR-425-5p的表達(dá)顯著上調(diào),ZNF423的表達(dá)顯著下調(diào)。穩(wěn)定抑制miR-425-5p表達(dá)的細(xì)胞株構(gòu)建成功。抑制miR-425-5p可顯著抑制MMP-2、MMP-9、Notch1、Hes5和Hey1蛋白的表達(dá),抑制SGC-7901細(xì)胞的遷移和侵襲。沉默ZNF423可逆轉(zhuǎn)抑制miR-425-5p表達(dá)對胃癌細(xì)胞遷移和侵襲的抑制...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染和分組
    1.3 qRT-PCR檢測
    1.4 雙熒光素酶報告基因檢測
    1.5 Western blot檢測
    1.6 Transwell法檢測細(xì)胞遷移和侵襲能力
    1.7 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果
    2.1 miR-425-5p和ZNF423在胃癌細(xì)胞中的表達(dá)
    2.2 抑制miR-425-5p表達(dá)對胃癌細(xì)胞SGC-7901遷移和侵襲的影響
    2.3 miR-425-5p靶向調(diào)控ZNF423的表達(dá)
    2.4 沉默ZNF423表達(dá)逆轉(zhuǎn)抑制miR-425-5p表達(dá)對胃癌細(xì)胞遷移和侵襲的影響
    2.5 miR-452-5p調(diào)控ZNF423表達(dá)影響胃癌細(xì)胞中Notch信號通路
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