[目 的]蒙古沙鼠圓窗膜上滴注不同濃度的哇巴因,建立不同程度耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(Spiral Ganglion Cells,SGCs)損傷的動(dòng)物模型;通過(guò)該動(dòng)物模型鼓階內(nèi)注入DJ-1基因慢病毒,研究耳蝸SGCs受損后,DJ-1基因慢病毒的轉(zhuǎn)染及其保護(hù)作用。[方 法]①聽(tīng)力正常的雄性蒙古沙鼠隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組。對(duì)照組沙鼠的右耳圓窗膜上滴注人工外淋巴液0.2ml,實(shí)驗(yàn)組沙鼠分成A、B、C三組并在右耳圓窗膜分別滴注濃度為33 μM、66 μ M、80 μM總量為0.2ml的哇巴因建立動(dòng)物模型。②包裝DJ-1基因慢病毒。③聽(tīng)力正常的蒙古沙鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組,對(duì)照組沙鼠右耳圓窗膜上滴注人工外淋巴液0.2ml,并于鼓階注入DJ-1基因慢病毒;實(shí)驗(yàn)組沙鼠分成A、B、C三組并于右耳圓窗膜分別滴注濃度為33μM、66μM、80μM總量為0.2ml的哇巴因,每組鼓階注入DJ-1慢病毒。兩周后行Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)DJ-1蛋白質(zhì)的表達(dá)。③在蛋白質(zhì)確切表達(dá)的基礎(chǔ)上觀察DJ-1對(duì)于不同程度耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞損傷的修復(fù)作用。[結(jié) 果]形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn):隨著哇巴因濃度的上升,SGCs數(shù)量逐漸下降...

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.1.2 主要試劑及儀器設(shè)備
        1.1.3 試劑配方
    1.2 方法
        1.2.1 實(shí)驗(yàn)分組及處理因素
        1.2.2 建立動(dòng)物模型
        1.2.3 慢病毒的包裝
        1.2.4 標(biāo)本制作方法
        1.2.5 電泳、轉(zhuǎn)膜、孵育抗體及顯影
        1.2.6 耳蝸石蠟切片制作步驟
        1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    2.1 慢病毒包裝及WESTBLOT結(jié)果分析
    2.2 光鏡結(jié)果分析
        2.2.1 光鏡下耳蝸病理切片形態(tài)學(xué)觀察
        2.2.2 耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞密度的比較
討論
    3.1 SGCs損傷所致感音神經(jīng)性耳聾
    3.2 慢病毒發(fā)現(xiàn)、發(fā)展及前景
    3.3 慢病毒包裝DJ-1與螺旋神經(jīng)細(xì)胞
    3.4 可能存在的問(wèn)題
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果
致謝



本文編號(hào)：3871529