發(fā)布時間：2023-12-09 11:58

　　[目 的]蒙古沙鼠圓窗膜上滴注不同濃度的哇巴因,建立不同程度耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細胞(Spiral Ganglion Cells,SGCs)損傷的動物模型;通過該動物模型鼓階內注入DJ-1基因慢病毒,研究耳蝸SGCs受損后,DJ-1基因慢病毒的轉染及其保護作用。[方 法]①聽力正常的雄性蒙古沙鼠隨機分成實驗組與對照組。對照組沙鼠的右耳圓窗膜上滴注人工外淋巴液0.2ml,實驗組沙鼠分成A、B、C三組并在右耳圓窗膜分別滴注濃度為33 μM、66 μ M、80 μM總量為0.2ml的哇巴因建立動物模型。②包裝DJ-1基因慢病毒。③聽力正常的蒙古沙鼠隨機分為實驗組及對照組,對照組沙鼠右耳圓窗膜上滴注人工外淋巴液0.2ml,并于鼓階注入DJ-1基因慢病毒;實驗組沙鼠分成A、B、C三組并于右耳圓窗膜分別滴注濃度為33μM、66μM、80μM總量為0.2ml的哇巴因,每組鼓階注入DJ-1慢病毒。兩周后行Western Blot實驗檢測DJ-1蛋白質的表達。③在蛋白質確切表達的基礎上觀察DJ-1對于不同程度耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細胞損傷的修復作用。[結 果]形態(tài)學觀察發(fā)現(xiàn):隨著哇巴因濃度的上升,SGCs數(shù)量逐漸下降...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 主要試劑及儀器設備
        1.1.3 試劑配方
    1.2 方法
        1.2.1 實驗分組及處理因素
        1.2.2 建立動物模型
        1.2.3 慢病毒的包裝
        1.2.4 標本制作方法
        1.2.5 電泳、轉膜、孵育抗體及顯影
        1.2.6 耳蝸石蠟切片制作步驟
        1.2.7 統(tǒng)計學處理
結果
    2.1 慢病毒包裝及WESTBLOT結果分析
    2.2 光鏡結果分析
        2.2.1 光鏡下耳蝸病理切片形態(tài)學觀察
        2.2.2 耳蝸螺旋神經(jīng)節(jié)細胞密度的比較
討論
    3.1 SGCs損傷所致感音神經(jīng)性耳聾
    3.2 慢病毒發(fā)現(xiàn)、發(fā)展及前景
    3.3 慢病毒包裝DJ-1與螺旋神經(jīng)細胞
    3.4 可能存在的問題
結論
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間獲得的學術成果
致謝



本文編號：3871529