藥用菊花為菊科植物菊(Chrysanthemum morifolium Ramat.)的干燥頭狀花序,是我國傳統(tǒng)中藥材和保健茶飲之一,其活性成分主要包含揮發(fā)油、黃酮、綠原酸、微量元素等,具有極高的飲用、藥用及觀賞價值。1-氨基環(huán)丙烷-1-羧酸氧化酶(ACO)是催化乙烯生物合成途徑最后一步的關鍵酶,控制著乙烯的生成速率。DA1基因編碼一種泛素受體,是植物中重要的細胞增殖調節(jié)因子,在擬南芥中DA1基因對種子和器官大小起負調節(jié)作用。本研究以皇菊為材料,優(yōu)化了皇菊的再生和遺傳轉化體系,克隆了皇菊中的CmACO和CmDA1基因并對CmACO和CmDA1基因進行了生物信息學分析,為進一步開展CmACO和CmDA1基因功能研究提供了便利,同時也為藥用皇菊的分子育種研究奠定了理論基礎。主要研究結果如下:1.對藥用皇菊的再生體系進行了優(yōu)化,獲得的最優(yōu)的誘導藥用皇菊葉盤分化出芽的條件為MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L,最優(yōu)的誘導藥用皇菊小苗生根的條件為1/2MS+NAA 0.1 mg/L。2.對藥用皇菊的遺傳轉化條件進行了優(yōu)化,并結合最優(yōu)的皇菊再生條件獲得了最優(yōu)的遺傳轉化體系為:預培...

【文章頁數(shù)】：47 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
縮略詞表
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 藥用植物的育種研究進展
    1.2 ACO基因研究進展
    1.3 DA1 基因研究進展
    1.4 菊花的基因克隆
    1.5 本研究的目的意義
    1.6 本研究的創(chuàng)新點
第二章 皇菊再生和遺傳轉化體系優(yōu)化
    2.1 引言
    2.2 材料、試劑與儀器
        2.2.1 皇菊無菌苗的獲得與培養(yǎng)
        2.2.2 農(nóng)桿菌和植物表達載體
        2.2.3 試劑
        2.2.4 儀器
    2.3 實驗方法
        2.3.1 皇菊再生體系的優(yōu)化
        2.3.2 農(nóng)桿菌介導的皇菊遺傳轉化條件的優(yōu)化
    2.4 實驗結果
        2.4.1 皇菊再生體系的優(yōu)化結果
        2.4.2 皇菊遺傳轉化條件的優(yōu)化結果
    2.5 討論
第三章 CmACO和 CmDA1 基因的同源克隆及序列分析
    3.1 引言
    3.2 材料、試劑與儀器
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 菌株與載體
        3.2.3 試劑
        3.2.4 主要儀器
    3.3 實驗方法
        3.3.1 CmACO和CmDA1 基因的同源克隆
        3.3.2 CmACO和CmDA1 基因cDNA序列的 5’和 3’RACE擴增
        3.3.3 CmACO和CmDA1 基因cDNA全長序列的克隆
        3.3.4 CmACO和CmDA1 基因DNA序列的克隆
        3.3.5 生物信息學分析
    3.4 實驗結果
        3.4.1 皇菊Total RNA的提取與檢測
        3.4.2 皇菊CmACO和CmDA1 基因同源片段的獲得
        3.4.3 皇菊CmACO和CmDA1 基因cDNA 5’和 3’RACE序列的獲得
        3.4.4 皇菊CmACO和CmDA1 基因cDNA全長序列的獲得
        3.4.5 皇菊CmACO和CmDA1 生物信息學分析
    3.5 討論
第四章 總結
參考文獻
致謝
作者簡介



本文編號：3843264