蛋白質(zhì)多聚ADP核糖化是一種翻譯后修飾方式,擬南芥中有3個(gè)編碼多聚ADP核糖化聚合酶的基因(PARP1,PARP2和PARP3)和兩個(gè)編碼多聚ADP核糖水解酶的基因(PARG1和PARG2),其中PARG1突變體parg1-4對(duì)基因毒劑極其敏感,為了了解PARP家族成員PARP2基因與parg1突變體表型的關(guān)系,本研究將PARP2突變體parp2-3與parg1-4雜交獲得了parp2-3parg1-4雙突變體,發(fā)現(xiàn)PARP2突變部分恢復(fù)了parg1-4對(duì)雙鏈斷裂基因毒劑zeocin和單鏈斷裂基因毒劑MMS敏感的表型.Western blot結(jié)果顯示:在zeocin和MMS處理下,parp2-3parg1-4中的PAR信號(hào)強(qiáng)度與parg1-4中的相比大大降低.實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示:在zeocin和MMS處理下,parg1-4中響應(yīng)DNA損傷的基因在脅迫初期被顯著誘導(dǎo),脅迫后期與細(xì)胞死亡相關(guān)的基因表達(dá)量明顯高于其他基因型植物,但PARP2突變后,parp2-3parg1-4中PAR水平和損傷及死亡基因的表達(dá)量均降低,從而部分恢復(fù)了parg1-4的敏感表型.

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 植物材料與生長條件
    1.2 方法
        1.2.1 植物總蛋白的提取
        1.2.2 Western blot
        1.2.3 植物雜交
        1.2.4 雙突變體的鑒定
        1.2.5 葉綠素含量測(cè)定
        1.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
2 結(jié)果與分析
    2.1 雙突變體p2g1在zeocin和MMS處理下的表型分析
    2.2 parp2-3和parg1-4單/雙突變體中PAR的水平分析
    2.3 zeocin和MMS處理下單/雙突變體中DNA損傷與死亡響應(yīng)基因的表達(dá)水平比較
3 討論



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