株高是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中重要的農(nóng)藝性狀,理想的株高在玉米育種工作中具有重要的意義。矮化植株抗倒伏能力強(qiáng),可以減少自然災(zāi)害帶來(lái)的損失,增加產(chǎn)量。因此,研究控制玉米株高遺傳機(jī)制在玉米育種工作中十分重要。本課題獲得了一株自發(fā)突變矮化表型的玉米突變體das。該突變體株高約為野生型的1/4。節(jié)間數(shù)目減少,節(jié)間長(zhǎng)度嚴(yán)重縮短。葉片深綠,葉中脈失綠,雌花發(fā)育異常,但雄花可以得到可育的花粉。我們根據(jù)突變體das和玉米自交系178重測(cè)序結(jié)果開(kāi)發(fā)InDel標(biāo)記,利用玉米自交系178和突變體das的F₂群體,通過(guò)圖位克隆的方法對(duì)引起突變表型的候選基因進(jìn)行了物理定位。,(1)將突變體das和玉米自交系178的重測(cè)序結(jié)果分別與B73參考基因組比對(duì),開(kāi)發(fā)并驗(yàn)證了均勻分布在玉米10對(duì)染色體上的102個(gè)分子標(biāo)記。利用圖位克隆技術(shù)將DAS基因初步定位到在5號(hào)染色體。(2)進(jìn)一步設(shè)計(jì)并驗(yàn)證得到38個(gè)具有多態(tài)性的分子標(biāo)記,將定位區(qū)間縮短至700 kb之間。(3)激素處理實(shí)驗(yàn)表明,突變體das對(duì)赤霉素敏感。通過(guò)噴施赤霉素,突變體的表型有一定程度的恢復(fù),但不能完全恢復(fù)至正常表型。

【文章頁(yè)數(shù)】：49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 農(nóng)作物矮桿突變體的育種現(xiàn)狀
        1.1.1 水稻矮桿突變體的育種現(xiàn)狀
        1.1.2 小麥矮桿突變體的育種現(xiàn)狀
        1.1.3 玉米矮桿突變體的育種現(xiàn)狀
        1.1.4 矮化突變體與節(jié)間的數(shù)目、長(zhǎng)度的關(guān)系
    1.2 植物激素對(duì)植株株高的調(diào)控
        1.2.1 赤霉素對(duì)株高的調(diào)控
        1.2.2 生長(zhǎng)素對(duì)植株株高的調(diào)控
        1.2.3 油菜素內(nèi)酯對(duì)植株株高的調(diào)控
    1.3 圖位克隆技術(shù)在玉米基因克隆研究中的應(yīng)用
        1.3.1 圖位克隆技術(shù)的定位原理
        1.3.2 圖位克隆技術(shù)重要的技術(shù)環(huán)節(jié)
            1.3.2.1 遺傳群體的構(gòu)建
            1.3.2.2 多態(tài)性遺傳分子標(biāo)記的開(kāi)發(fā)、篩選及利用
            1.3.2.3 目的基因的初步定位
            1.3.2.4 目的基因的精細(xì)定位
            1.3.2.5 候選基因的獲得和目的基因的功能驗(yàn)證
            1.3.2.6 圖位克隆技術(shù)遇到的問(wèn)題及解決方法
    1.4 本研究的目的與意義
第二章 玉米das突變體的性狀鑒定
    2.1 突變體及野生型農(nóng)藝性狀的鑒定
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 玉米性狀的統(tǒng)計(jì)方法
        2.1.3 突變體及野生型農(nóng)藝性狀的分析
            2.1.3.1 突變體與野生型株高比較
            2.1.3.2 突變體與野生型節(jié)間表型的比較
            2.1.3.3 突變體與野生型根部表型的比較
            2.1.3.4 突變體與野生型育性的比較
    2.2 突變體das對(duì)植物激素敏感性鑒定
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 試劑
        2.2.3 赤霉素處理步驟
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 赤霉素處理結(jié)果分析
第三章 遺傳分子標(biāo)記的開(kāi)發(fā)
    3.1 InDel分子標(biāo)記的開(kāi)發(fā)
    3.2 InDel遺傳分子標(biāo)記設(shè)計(jì)結(jié)果
第四章 DAS基因的圖位克隆
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
    4.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        4.2.2 突變體顯隱性突變的鑒定
        4.2.3 圖位克隆群體的配制
        4.2.4 圖位克隆定位F2分離群體葉片DNA提取
        4.2.5 PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系
        4.2.6 瓊脂糖凝膠電泳
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 DAS基因的遺傳分析
        4.3.2 DAS基因的初步定位
        4.3.3 DAS基因的精細(xì)定位
        4.3.4 結(jié)論分析
第五章 結(jié)論與討論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3785158