株高是農業(yè)生產中重要的農藝性狀,理想的株高在玉米育種工作中具有重要的意義。矮化植株抗倒伏能力強,可以減少自然災害帶來的損失,增加產量。因此,研究控制玉米株高遺傳機制在玉米育種工作中十分重要。本課題獲得了一株自發(fā)突變矮化表型的玉米突變體das。該突變體株高約為野生型的1/4。節(jié)間數目減少,節(jié)間長度嚴重縮短。葉片深綠,葉中脈失綠,雌花發(fā)育異常,但雄花可以得到可育的花粉。我們根據突變體das和玉米自交系178重測序結果開發(fā)InDel標記,利用玉米自交系178和突變體das的F₂群體,通過圖位克隆的方法對引起突變表型的候選基因進行了物理定位。,(1)將突變體das和玉米自交系178的重測序結果分別與B73參考基因組比對,開發(fā)并驗證了均勻分布在玉米10對染色體上的102個分子標記。利用圖位克隆技術將DAS基因初步定位到在5號染色體。(2)進一步設計并驗證得到38個具有多態(tài)性的分子標記,將定位區(qū)間縮短至700 kb之間。(3)激素處理實驗表明,突變體das對赤霉素敏感。通過噴施赤霉素,突變體的表型有一定程度的恢復,但不能完全恢復至正常表型。

【文章頁數】：49 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 農作物矮桿突變體的育種現狀
        1.1.1 水稻矮桿突變體的育種現狀
        1.1.2 小麥矮桿突變體的育種現狀
        1.1.3 玉米矮桿突變體的育種現狀
        1.1.4 矮化突變體與節(jié)間的數目、長度的關系
    1.2 植物激素對植株株高的調控
        1.2.1 赤霉素對株高的調控
        1.2.2 生長素對植株株高的調控
        1.2.3 油菜素內酯對植株株高的調控
    1.3 圖位克隆技術在玉米基因克隆研究中的應用
        1.3.1 圖位克隆技術的定位原理
        1.3.2 圖位克隆技術重要的技術環(huán)節(jié)
            1.3.2.1 遺傳群體的構建
            1.3.2.2 多態(tài)性遺傳分子標記的開發(fā)、篩選及利用
            1.3.2.3 目的基因的初步定位
            1.3.2.4 目的基因的精細定位
            1.3.2.5 候選基因的獲得和目的基因的功能驗證
            1.3.2.6 圖位克隆技術遇到的問題及解決方法
    1.4 本研究的目的與意義
第二章 玉米das突變體的性狀鑒定
    2.1 突變體及野生型農藝性狀的鑒定
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 玉米性狀的統(tǒng)計方法
        2.1.3 突變體及野生型農藝性狀的分析
            2.1.3.1 突變體與野生型株高比較
            2.1.3.2 突變體與野生型節(jié)間表型的比較
            2.1.3.3 突變體與野生型根部表型的比較
            2.1.3.4 突變體與野生型育性的比較
    2.2 突變體das對植物激素敏感性鑒定
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 試劑
        2.2.3 赤霉素處理步驟
    2.3 結果與分析
        2.3.1 赤霉素處理結果分析
第三章 遺傳分子標記的開發(fā)
    3.1 InDel分子標記的開發(fā)
    3.2 InDel遺傳分子標記設計結果
第四章 DAS基因的圖位克隆
    4.1 實驗材料
    4.2 實驗試劑
        4.2.1 實驗儀器
        4.2.2 突變體顯隱性突變的鑒定
        4.2.3 圖位克隆群體的配制
        4.2.4 圖位克隆定位F2分離群體葉片DNA提取
        4.2.5 PCR擴增反應體系
        4.2.6 瓊脂糖凝膠電泳
    4.3 結果與分析
        4.3.1 DAS基因的遺傳分析
        4.3.2 DAS基因的初步定位
        4.3.3 DAS基因的精細定位
        4.3.4 結論分析
第五章 結論與討論
參考文獻
附錄
致謝
作者簡歷



本文編號：3785158