隨著我國轉(zhuǎn)基因研究及產(chǎn)業(yè)化進程提速,轉(zhuǎn)基因檢測的重要性日益凸顯,因而快速、高效的分子檢測新方法的研發(fā)具有重要的生產(chǎn)實踐及科研意義。在轉(zhuǎn)基因檢測中,常規(guī)PCR技術(shù)具有檢測范圍廣的特點,但較為費時費力,且對實驗條件要求較高;而膠體金蛋白試紙法檢測方便、快捷,但可檢范圍窄。基于此,建立了一套基于核酸層析法快速轉(zhuǎn)基因檢測的方法體系。將經(jīng)液氨研磨后的樣品通過一管法提取DNA后直接進行PCR擴增,再將PCR擴增產(chǎn)物滴加到膠體金檢測卡上,通過直接觀察膠體金卡條顯色狀況進行結(jié)果判別。此方法最終檢驗出玉米內(nèi)參基因ZSSⅡB及Zein、大豆內(nèi)參基因SPS、水稻內(nèi)參基因Lectin,轉(zhuǎn)基因元件啟動子CaMV35S及終止子NOS,以及抗蟲基因Cry1Ab/1Ac、抗除草劑基因Bar、Pat、CP4-EPSPS及選擇標記基因NPTⅡ、Pmi等外源基因;并成功檢出特異性轉(zhuǎn)基因事件Mir604及Bt11。研究獲得的核酸層析檢測方法具有靈敏度高、省時省力且對檢測條件要求低等優(yōu)點,集PCR法與蛋白試紙檢測法二者優(yōu)勢于一身,可廣泛應(yīng)用于轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的精確快速檢測,為我國轉(zhuǎn)基因生物安全監(jiān)管提供了良好的技術(shù)支撐。

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗材料
    1.2 主要試劑及儀器設(shè)備
    1.3 標記基因及選用引物
    1.4 樣本處理
    1.5 一管法DNA提取
    1.6 PCR方法
    1.7 PCR產(chǎn)物膠體金檢測
2 結(jié)果與分析
    2.1 內(nèi)參基因檢測
    2.2 轉(zhuǎn)基因元件檢測
    2.3 外源基因及特異性轉(zhuǎn)基因事件檢測結(jié)果
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