目的:對內質網分子伴侶29 (ERp29)與前列腺癌患者的臨床病理特征相關性進行綜合分析以及RNA干擾ERp29基因對LNCaP前列腺癌細胞株侵襲的影響及其機制。方法:通過免疫組化法檢測良性前列腺增生組織和前列腺癌組織中ERp29的表達,通過Western印跡方法檢測6例前列腺癌組織以及臨近正常組織中ERp29蛋白的差異性;通過脂質體轉染法將特異性沉默ERp29基因的siRNA轉染人LNCaP細胞;分別用實時熒光定量PCR (qRT-PCR)和Western印跡方法檢測ERp29 siRNA對LNCaP細胞ERp29基因和蛋白表達的抑制作用;運用MTT法檢測LNCaP細胞的增殖活力;利用Transwell法檢測細胞體外遷移及侵襲能力;通過qRT-PCR法檢測上皮-間質轉化相關標志物變化。結果:前列腺癌中ERp29的高表達陽性率低于非腫瘤前列腺組織(73.9%vs 91.9%,P<0.05);前列腺癌組織中的ERp29低表達陽性率與M分期顯著相關(P<0.05)。LNCaP細胞轉染ERp29 siRNA后,其細胞增殖能力顯著增強,遷移和侵襲能力也顯著提高,差異有統(tǒng)計學意義(P...

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 主要試劑
    1.2 細胞及細胞培養(yǎng)
    1.3 一般資料
    1.4 免疫組化法
    1.5 細胞轉染
    1.6 MTT
    1.7 Transwell侵襲與遷移實驗
        1.7.1 Transwell侵襲實驗
        1.7.2 Transwell遷移實驗
    1.8 qRT-PCR LNCaP細胞轉染
    1.9 Western 印跡實驗
    1.10 統(tǒng)計學分析
2 結果
    2.1 ERp29在PCa組織和細胞株中下調
    2.2 ERp29表達水平與PCa患者的轉移相關
    2.3 靶向ERp29的siRNA對PCa細胞株LNCaP的影響
    2.4 靶向ERp29的siRNA對LNCaP細胞株EMT的影響
3 討論



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