RNA沉默ERp29基因促進(jìn)人前列腺癌細(xì)胞體外侵襲及其機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2023-03-19 00:26
目的:對(duì)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶29 (ERp29)與前列腺癌患者的臨床病理特征相關(guān)性進(jìn)行綜合分析以及RNA干擾ERp29基因?qū)NCaP前列腺癌細(xì)胞株侵襲的影響及其機(jī)制。方法:通過(guò)免疫組化法檢測(cè)良性前列腺增生組織和前列腺癌組織中ERp29的表達(dá),通過(guò)Western印跡方法檢測(cè)6例前列腺癌組織以及臨近正常組織中ERp29蛋白的差異性;通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法將特異性沉默ERp29基因的siRNA轉(zhuǎn)染人LNCaP細(xì)胞;分別用實(shí)時(shí)熒光定量PCR (qRT-PCR)和Western印跡方法檢測(cè)ERp29 siRNA對(duì)LNCaP細(xì)胞ERp29基因和蛋白表達(dá)的抑制作用;運(yùn)用MTT法檢測(cè)LNCaP細(xì)胞的增殖活力;利用Transwell法檢測(cè)細(xì)胞體外遷移及侵襲能力;通過(guò)qRT-PCR法檢測(cè)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)標(biāo)志物變化。結(jié)果:前列腺癌中ERp29的高表達(dá)陽(yáng)性率低于非腫瘤前列腺組織(73.9%vs 91.9%,P<0.05);前列腺癌組織中的ERp29低表達(dá)陽(yáng)性率與M分期顯著相關(guān)(P<0.05)。LNCaP細(xì)胞轉(zhuǎn)染ERp29 siRNA后,其細(xì)胞增殖能力顯著增強(qiáng),遷移和侵襲能力也顯著提高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P...
【文章頁(yè)數(shù)】:9 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 主要試劑
1.2 細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)
1.3 一般資料
1.4 免疫組化法
1.5 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
1.6 MTT
1.7 Transwell侵襲與遷移實(shí)驗(yàn)
1.7.1 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)
1.7.2 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)
1.8 qRT-PCR LNCaP細(xì)胞轉(zhuǎn)染
1.9 Western 印跡實(shí)驗(yàn)
1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 ERp29在PCa組織和細(xì)胞株中下調(diào)
2.2 ERp29表達(dá)水平與PCa患者的轉(zhuǎn)移相關(guān)
2.3 靶向ERp29的siRNA對(duì)PCa細(xì)胞株LNCaP的影響
2.4 靶向ERp29的siRNA對(duì)LNCaP細(xì)胞株EMT的影響
3 討論
本文編號(hào):3764168
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【文章目錄】:
1 材料和方法
1.1 主要試劑
1.2 細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)
1.3 一般資料
1.4 免疫組化法
1.5 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
1.6 MTT
1.7 Transwell侵襲與遷移實(shí)驗(yàn)
1.7.1 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)
1.7.2 Transwell遷移實(shí)驗(yàn)
1.8 qRT-PCR LNCaP細(xì)胞轉(zhuǎn)染
1.9 Western 印跡實(shí)驗(yàn)
1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 ERp29在PCa組織和細(xì)胞株中下調(diào)
2.2 ERp29表達(dá)水平與PCa患者的轉(zhuǎn)移相關(guān)
2.3 靶向ERp29的siRNA對(duì)PCa細(xì)胞株LNCaP的影響
2.4 靶向ERp29的siRNA對(duì)LNCaP細(xì)胞株EMT的影響
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