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香茅草單萜合成酶基因的克

發(fā)布時(shí)間:2023-03-13 21:00
  植物資源的綜合應(yīng)用是目前的研究熱點(diǎn),開發(fā)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的植物源產(chǎn)品在現(xiàn)在市場(chǎng)上尤為迫切。大多數(shù)植物的次生代謝產(chǎn)物主要有萜類、生物堿、苯丙烷類等,植物次生代謝產(chǎn)物對(duì)植物本身和人類有著極其重要作用。對(duì)于植物,產(chǎn)生次生代謝產(chǎn)物是面對(duì)惡劣環(huán)境下保護(hù)自身的手段;而對(duì)于我們?nèi)祟惗?很多植物次生代謝產(chǎn)物具有治療疾病的重要功效,也是醫(yī)藥品和化妝品的重要來源。其中,萜類化合物是植物次生代謝產(chǎn)物中最多樣化的天然代謝產(chǎn)物,具有重要的藥理作用和廣泛的生物學(xué)功能。因而,闡明萜類化合物在植物中的生物合成途徑,研究其分子調(diào)控機(jī)制有著重要的意義。香茅(Cymbopogon citratus)具有栽培容易、易于管理、投資小、見效快等優(yōu)點(diǎn),易于發(fā)展大規(guī)模種植。其莖葉提取的精油在食物、防腐、醫(yī)藥等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。有研究證實(shí),香茅草精油中主要成分為萜類化合物,其藥理作用主要包括抗菌、消炎、止痛、抗氧化、抑制腫瘤、抗焦慮、降低血糖及降壓等。以往對(duì)香茅草的研究主要集中在其精油的提取和成分分析,對(duì)其重要化合物的生物合成及代謝調(diào)控的研究相對(duì)較少,基因組中大多數(shù)基因的功能仍不清楚,因此無法調(diào)控其特有的合成途徑從而大幅度提高其產(chǎn)物的...

【文章頁數(shù)】:46 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 前言
    1.2 香茅草研究概述
    1.3 萜類化合物及其功能
        1.3.1 萜類化合物
        1.3.2 萜類化合物的功能
    1.4 .萜類生物合成途徑
    1.5 萜類合成酶的研究概況
        1.5.1 萜類合成酶的結(jié)構(gòu)與功能
        1.5.2 萜類合成酶的進(jìn)化和分類
        1.5.3 萜類合成酶基因的克隆及研究進(jìn)展
    1.6 課題研究?jī)?nèi)容、研究目的及意義
        1.6.1 主要研究?jī)?nèi)容
        1.6.2 研究目的及意義
第二章 材料與方法
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 植物材料
        2.2.2 主要試劑及器材
        2.2.3 質(zhì)粒與菌株:
    2.3 香茅草單萜合成酶基因的克隆
        2.3.1 .香茅草總RNA的提取
        2.3.2 RNA質(zhì)量檢測(cè)
        2.3.3 cDNA文庫構(gòu)建—RNA反轉(zhuǎn)錄
        2.3.4 引物設(shè)計(jì)
        2.3.5 目的基因片段的獲取
        2.3.6 蛋白的親疏水性分析[69-70]
    2.4 原核表達(dá)體系的建立和優(yōu)化
        2.4.1 原核表達(dá)載體構(gòu)建
        2.4.2 表達(dá)載體和目的基因的連接
        2.4.3 目的蛋白的原核表達(dá)
        2.4.4 聚丙烯凝膠電泳(SDS-PAGE)檢測(cè)
    2.5 表達(dá)蛋白的純化
        2.5.1 蛋白的提取與純化
第三章 結(jié)果與分析
    3.1 .總RNA電泳檢測(cè)結(jié)果
    3.2 目的片段獲取與鑒定
    3.3 編碼蛋白的親疏水性分析
    3.4 目的蛋白的SDS-PAGE檢測(cè)結(jié)果
    3.5 蛋白純化SDS-PAGE檢測(cè)
    3.6 本章小結(jié)
第四章 總結(jié)與展望
    4.1 總結(jié)
    4.2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào):3762381

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