目的:乳腺癌在女性中發(fā)病率排第一位,死亡率居第二位,且我國(guó)乳腺癌發(fā)病率還呈逐年增加趨勢(shì)。因此,對(duì)乳腺癌發(fā)病機(jī)制的研究顯得尤其重要。NODAL蛋白是一種細(xì)胞因子,主要在維持胚胎干細(xì)胞不分化、形成內(nèi)臟器官左右不對(duì)稱等過程中發(fā)揮重要作用。NODAL分子作為胚胎蛋白,一般在正常組織細(xì)胞中不表達(dá),最近研究發(fā)現(xiàn)在腫瘤細(xì)胞中NODAL蛋白高表達(dá),可能與腫瘤的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)。但是,目前對(duì)NODAL分子促腫瘤作用的詳細(xì)分子機(jī)制并不十分清楚。本研究希望利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)定點(diǎn)敲除三陰性乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231的NODAL基因,以構(gòu)建敲除NODAL基因的細(xì)胞模型,為進(jìn)一步揭示NODAL基因在乳腺癌細(xì)胞中發(fā)揮作用的分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。此外,還希望通過本研究搭建基因編輯技術(shù)平臺(tái)。方法:1.設(shè)計(jì)敲除方案根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)和預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定基因敲除的靶細(xì)胞,然后通過生物信息學(xué)方法分析NODAL基因的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),確定NODAL基因敲除的靶位點(diǎn)。本研究制定了兩套敲除NODAL基因的方案,方案A希望將NODAL基因的3個(gè)外顯子全部敲除,方案B僅敲除NODAL基因的第二外顯子。2.構(gòu)建Cas9/sgRNA...

【文章頁數(shù)】：94 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料與方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
中英文縮寫對(duì)照
致謝
綜述 Crispr/cas9基因編輯技術(shù)在乳腺癌研究中的應(yīng)用進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3762206