擬穴青蟹(Scylla paramamosain)是我國(guó)比較受歡迎的海產(chǎn)蟹類之一。所以,研究者對(duì)于青蟹的關(guān)注日益增加,尤其是對(duì)于人工養(yǎng)殖和育苗過程中面臨的問題,主要是關(guān)于養(yǎng)殖規(guī)模小、膏蟹產(chǎn)量低、性早熟、溞狀幼體到仔蟹培育時(shí)死亡率高、病害等。甲殼類內(nèi)分泌學(xué)方面的研究對(duì)于這些問題的解決具有重要的指導(dǎo)意義。甲基法尼酯(Methyl farnesoate,MF)是調(diào)節(jié)擬穴青蟹生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖過程中重要的內(nèi)分泌激素之一,由大顎器(Mandibular organ,MO)合成和分泌,在青蟹性成熟和幼體變態(tài)發(fā)育中起著至關(guān)重要的作用。本論文以擬穴青蟹內(nèi)分泌激素MF為主線,借助RACE技術(shù)克隆獲得擬穴青蟹MF合成過程中的幾個(gè)關(guān)鍵調(diào)控基因,同時(shí)采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)對(duì)其不同幼體發(fā)育時(shí)期、不同卵巢分期及不同組織的表達(dá)模式進(jìn)行分析,探討這些基因在個(gè)體發(fā)育過程中的作用,并對(duì)保幼激素酸甲基轉(zhuǎn)移酶(juvenile hormone acid methyl transferase,JHAMT)的蛋白表達(dá)進(jìn)行分析,為解決擬穴青蟹人工養(yǎng)殖和育苗中出現(xiàn)的問題提供參考理論基礎(chǔ)。獲得的主要研究成果如下:1.擬穴青蟹FPPS、...

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 引言
    1.1 甲殼動(dòng)物中甲基法尼酯的介紹
    1.2 MF的合成過程
    1.3 MF合成的調(diào)控
        1.3.1 眼柄的調(diào)控
        1.3.2 神經(jīng)肽的調(diào)控
        1.3.3 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控
        1.3.4 MF的作用機(jī)制
    1.4 甲基法尼酯的降解過程
    1.5 甲基法尼酯的功能
        1.5.1 調(diào)控甲殼類的蛻皮生長(zhǎng)
        1.5.2 調(diào)控甲殼類的性腺發(fā)育
    1.6 JHAMT的研究進(jìn)展
    1.7 甲基轉(zhuǎn)移酶的簡(jiǎn)介
        1.7.1 甲基轉(zhuǎn)移酶的功能
        1.7.2 甲基轉(zhuǎn)移酶的分類
    1.8 本研究的意義和目的
第二章 擬穴青蟹MF合成通路基因的克隆和表達(dá)分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2.1 擬穴青蟹的FPPS基因的克隆及表達(dá)分析
        2.2.2 Sp-FoD基因的克隆和表達(dá)分析
        2.2.3 Sp-FaD基因的克隆和表達(dá)分析
    2.3 討論
第三章 擬穴青蟹JHAMT基因的蛋白表達(dá)分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 Sp-JHAMT的生物學(xué)信息
        3.2.2 Sp-JHAMT基因PCR擴(kuò)增產(chǎn)物
        3.2.3 pET28a載體雙酶切
        3.2.4 重組質(zhì)粒菌落PCR驗(yàn)證和雙酶切鑒定
        3.2.5 重組蛋白表達(dá)分析
        3.2.6 重組蛋白純化
    3.3 討論
第四章 小結(jié)
    4.1 研究總結(jié)
    4.2 本文創(chuàng)新點(diǎn)
參考文獻(xiàn)
附錄
附件
致謝



本文編號(hào)：3757238