冠突曲霉（Aspergillus cristatus）能獲得純的無(wú)性或有性孢子,是研究曲霉有性產(chǎn)孢的優(yōu)選材料。前期研究分析了冠突曲霉的野生型菌株和MAT基因敲除菌株的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),結(jié)果表明信息素受體基因（preA和preB）與交配型基因（MAT1-1和MAT1-2）可能存在調(diào)控關(guān)系。本研究利用基因敲除技術(shù)研究信息素受體基因preA的功能,結(jié)果顯示preA基因參與了冠突曲霉的有性發(fā)育,是閉囊殼、子囊和子囊孢子正常發(fā)育所必需;且在子囊和子囊孢子形成階段,preA基因?qū)AT1-1基因在表達(dá)水平上是正調(diào)控關(guān)系;而在營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)和閉囊殼形成階段,preA基因?qū)AT1-1和MAT1-2基因均是負(fù)調(diào)控作用。本研究結(jié)果表明preA基因在冠突曲霉有性發(fā)育中的功能,對(duì)闡釋MAT基因?qū)τ行园l(fā)育的調(diào)控功能具有重要意義。 

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【文章目錄】：
1 結(jié)果與分析
    1.1 Δpre A突變體的篩選
    1.2 pre A基因敲除菌株的形態(tài)學(xué)觀察
    1.3 pre A基因敲除株的外源基因拷貝數(shù)檢測(cè)
        1.3.1 引物特異性檢測(cè)
        1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        1.3.3 pre A基因敲除株中實(shí)時(shí)熒光的檢測(cè)
        1.3.4 pre A基因的表達(dá)
2 討論
3 材料與方法
    3.1 菌株
    3.2 試劑和引物
    3.3 培養(yǎng)基
    3.4 pre A基因序列的分析和引物信息
    3.5 重組質(zhì)粒pre A-L-p DHt/sk-hyg-pre A-R的構(gòu)建
    3.6 重組質(zhì)粒pre A-L-p DHt/sk-hyg-pre A-R轉(zhuǎn)化根癌農(nóng)桿菌的驗(yàn)證
    3.7 Δpre A突變株的篩選
    3.8 Δpre A突變株的表型以及顯微結(jié)構(gòu)觀察
    3.9 冠突曲霉不同生長(zhǎng)階段pre A基因的表達(dá)量分析
    3.1 0 Δpre A突變株的HYG基因的拷貝數(shù)分析
作者貢獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]冠突散囊菌不同生長(zhǎng)階段MAT基因的表達(dá)量變化[J]. 葛永怡,吳石平,譚玉梅,劉永翔,劉作易.  西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2015(06)
[2]一種新穎簡(jiǎn)便的熒光實(shí)時(shí)RT-PCR相對(duì)定量方法的建立[J]. 張馳宇,徐順高,黃新祥.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2005(09)



本文編號(hào)：3726430